人小肠粘膜上皮细胞提取物说明书

人小肠粘膜上皮细胞提取物【Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】

人小肠粘膜上皮细胞提取物是从人原代小肠粘膜上皮细胞提取的，人小肠粘膜上皮细胞从正常人小肠粘膜上皮组织制备。正常人小肠粘膜上皮组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

转基因植物NPTII单重荧光PCR检测试剂盒（不含提取）481-Acetyl-piperidinecarboxylic acid251-乙酰基-甲酸

植物基因组DNA提取试剂盒（过柱法）（用于从植物中分离纯化高质量植物基因组）(S)-(4-Aminobenzyl)(1H)-oxazolidinone15253(s)-(4-氨基苄基),3-噁唑烷-酮

牛源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（定量）（不含提取）482-Amino-Formylchromone6142462-氨基-甲酰基色原酮

羊源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（定量）（不含提取）482-Aminodiphenylamine5345邻氨基

鸭源性成分单重荧光PCR检测试剂盒（定量）（不含提取）48Acid Black 1648酸性黑 1
p-Nitrohydrocinnamic acid  16642-79-8  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子C(mouse VEGF-C)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Pitavastatin ethyl ester  167073-19-0  中文名：  分子式：C27H28FNO4  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子D(mouse VEGF-D)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Pitavastatin calcium  147526-32-7  中文名：匹伐他汀钙  分子式：C50H46CaF2N2O8  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子受体1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子B   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor B   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-B

Piracetam  7491-74-9  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子C   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor C   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-C
紫檀芪（标准品）  Pterostilbene  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA检测试剂盒MouseAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T

紫檀芪,紫檀  Pterostilbene  质量规格：>99%,BR 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 ，英文名： AT ELISA Kit

鱼藤酮  Rotenone  质量规格：>90%,BR 小鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒 ，英文名： PCNA ELISA Kit

7-表紫杉醇（标准品）  7-Epitaxol  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA检测试剂盒Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T

澳洲茄胺;澳州茄胺（标准品）  Solasodine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒 ，英文名： PCNA ELISA Kit

细辛脂素（标准品）  L-Asarinin/ (-)-asarinin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 ，英文名： ACA ELISA Kit

大黄酚-8-O-葡萄糖苷（标准品）  Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA检测试剂盒MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

金合欢素;刺槐素（标准品）  Acacetin  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒 ，英文名： pANCA ELISA Kit

氯化木兰花碱（标准品）  Escholine chloride  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA检测试剂盒MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T

蒲公英甾醇乙酸酯（标准品）  taraxasteryl acetate  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒 ，英文名： EMAb ELISA Kit
人小肠粘膜上皮细胞提取物说明书Senkyunolide C  91652-78-7  中文名：洋川芎内酯C  分子式：C12H12O3    Humanplacealprotein，PPELISAKit人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Docosanoic acid  112-85-6  中文名：二十二烷酸  分子式：C22H44O2    兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O    Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒

Glycerol  56-81-5  中文名：甘油  分子式：C3H8O3    HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Riligustilide  89354-45-0  中文名：  分子式：C24H28O4    Humandeoxypyridinoline,DPDELISA试剂盒人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格：96T/48T