大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒Rat matrix metalloproteinases 13 /MMP-13 ELISA Kit 产品名称 | 大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒 | 英文名称 | Rat matrix metalloproteinases 13 /MMP-13 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒Rat matrix metalloproteinases 13 /MMP-13 ELISA Kit【实验用途】MMP-13（基质金属蛋白酶-13），为MMPs家族。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)是一个高度保守且依赖于锌离子的内切蛋白水解酶家族，其中MMP-13属于MMPs中的胶原酶亚家族，又称为胶原酶3 （collagenase-3），可以降解细胞外基质中的Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ型胶原和蛋白酶，因此MMP-13的表达增强有利于细胞外基质降解，可能与恶性肿瘤浸润，转移及预后相关。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂（ELISA）。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。。
试剂配制:
1、大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
样本处理及要求：
1.大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
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TRCB392710 / 1mg6-[2-Biotinylamidoethyl]-dithiopropionamido]-5,9-diaza-6,8-diketotridecanoic Acid Bis-N-sulfosuccinimidyl Ester Disodium Salt3150 TRCB386815 / 1mg1163135-92-9(15R)-Bimatoprost3150 TRCB385302 / 1mgBilirubin-d43150 TRCB327057 / 1mgBetamethasone 9,11-Epoxide 17-Propionate-d53150 TRCB318000 / 1mg88475-69-8Beraprost Sodium Salt3150 TRCB288162 / 1mg5-Benzyloxy Rosiglitazone-d43150 TRCB287580 / 100mg325480-40-8(1R,2R)-2-((Benzyloxy)methyl)cyclopent-3-enol3150
大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒英文名称：FBS胎牛血清规格:25 ml 英文名称：T/E胰酶/EDTA消化液规格:100 ml 英文名称：TNS胰酶中和液规格:100 ml 英文名称：NECDS 非酶细胞裂解液规格:100 ml 英文名称：CFM细胞冻存液规格:50 ml 英文名称：SF-CFM无血清细胞冻存液规格:50 ml 英文名称：TB台盼蓝规格:50 ml 英文名称：DPBS磷酸盐缓冲注规格:500 ml
注意事项：
1．大鼠基质金属蛋白酶-13 elisa检测试剂盒试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 |
