大鼠关节软骨细胞提取物 【Rat Bone: Normal Articular Chondrocyte Derivatives】 大鼠关节软骨细胞提取物是从大鼠关节软骨细胞提取的,大鼠关节软骨细胞从正常大鼠大鼠关节软骨组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 大鼠关节软骨细胞提取物 价格 | 英文名称 | Rat Bone: Normal Articular Chondrocyte Derivatives | 货号 | EYX99216 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 磺胺总量Elisa检测试剂盒96Allyl cinnamate18661肉桂酸烯丙酯 黄曲霉毒素总量Elisa检测试剂盒962-Aminofluorene15382-氨基芴 黄曲霉毒素B1 Elisa检测试剂盒96Allylthiourea97烯丙基 黄曲霉毒素M1 Elisa检测试剂盒96(1R,2S)-Amino-inda30(1R,2S)-氨基-茚醇 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)Elisa检测试剂盒96Amitraz3891双甲眯 Humandermato-poin,DPTELISA试剂盒人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒规格:96T/48T 18-Hydroxytritriacontan-16-one 中文名: 分子式:C33H66O2 Humandermatansulfate,DSELISA试剂盒人皮肤素(DS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1'-Acetonaphthone 941-98-0 中文名:1'-萘乙酮 分子式:C12H10O Humandeoxyuridineiphate,DPELISA试剂盒人脱氧尿三0酸(DP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1-Acetoxy-9,17-octadecadiene-12,14-diyne-11,16-diol 中文名: 分子式:C20H28O4 Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA试剂盒人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 13369-74-9 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISA试剂盒人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1-Amino-2-methylanthraquinone 中文名:1-氨基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H11NO2 脱水长春碱(标准品) Anhydrovinblastine 质量规格:HPLC≥95%,标准品 小鼠抗双链DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒 ,英文名: dsDNA ELISA Kit 长春新碱(标准品) Vincristine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(dsDNA)ELISA检测试剂盒Mouseai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 96T/48T 硫酸金雀花碱;硫酸司巴丁(标准品) Sparteine sulfate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶(ACP)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP ELISA Kit 高乌甲素(标准品) Lappaconitine 质量规格:滴定法≥98%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶(ACP5)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP5 ELISA Kit 番茄红素(标准品) Lycopene 质量规格:HPLC≥90%,标准品,充氮气保护 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 苔黑酚葡萄糖苷;地衣二醇葡萄糖苷(标准品) Orcinol glucosid 质量规格:HPLC≥97%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP5b ELISA Kit 短葶山麦冬皂苷C(标准品) Liriope muscari baily saponins C 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒 ,英文名: ACP-5b ELISA Kit 百两金素A(标准品) Ardisiacrispin A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 ,英文名: aZP ELISA Kit 柳穿鱼黄素(标准品) Pectolinarigenin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗透明带抗体IgG(aZP-IgG)ELISA试剂盒 ,英文名: aZP-IgG ELISA Kit 瓜子金皂苷己(标准品) Polygalasaponin F 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗线粒体抗体(AMA)ELISA试剂盒 ,英文名: AMA ELISA Kit 大鼠关节软骨细胞提取物 价格人维生素D(VD)ELISAKit Tigecycline 220620-09-7 中文名: 分子式:C29H39N5O8 人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit 2-Benzothiazolol 中文名:2-羟基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS 人突触足蛋白(SYNPO)酶联吸附测定试剂盒 Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名: 分子式:C19H14F2O6 人铁蛋白(FE)酶联吸附测定试剂盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 人特异性抗原(TSA)ELISA试剂盒 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO |