大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书Rat MPO ELISA Kit【实验用途】髓过氧化物酶(MPO)是一种血色素蛋白(分子质量 118kDa),含一对重链和轻链 ,它存于嗜中性多核细胞的嗜天青颗粒和巨嗜细胞中,其功能为将氯化物和过氧化氢转变为次氯酸盐。在炎症状态下,它被释放入细胞外液进入循环,因此传统认为是一种杀菌的酶,在人体的天然防御 、免疫功能方面起重要作用。此酶参与含低密度脂蛋白(1ow density li—poprotein,LDL)的脂类氧化。以邻位二氨基苯胺盐酸盐为底物加过氧化氢可定量血中和组织中的酶活性。MPO能氧化低密度脂蛋白胆固醇(1ow density lipoprotein cholesterol,LD—LC),从而有利于巨噬细胞摄取LDLC并转变为泡沫细胞 ;氧化高密度脂蛋白(hi density lipoprotein,HDL),使其失去正常的功能;另外,MPO激活金属蛋白酶、使粥样硬化斑块表 面不稳定趋于破裂;同时 MPO还催化消耗 内皮衍生的一 氧化氮(nitric oxide,NO),从而减少 NO的生物利用度,损害 N0的血管扩张和抗炎功能Is]。关于 MPO的测定方法有多 种,紫外分光光度比色法、流式细胞仪和免疫组织化学染色 法 用来检测循环中和组织中多形核细胞的 MPO活性,而 近期出现的酶联免疫的定量法可测定血液中MPO的浓度。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。。 试剂配制: 1、大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。 2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。 3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书Rat MPO ELISA Kit 产品名称 | 大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书 | 英文名称 | Rat MPO ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
样本处理及要求: 1.大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。 仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 注意事项: 1.大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物请避光保存。 7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物请避光保存。 7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 以下是大鼠髓过氧化物酶 elisa检测试剂盒说明书的相关产品,点击了解更多大鼠elisa检测试剂盒。 TRCM303837 / 1mg3-O-Methyl-L-DOPA-d3 4-Glucuronide2800
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