大鼠支气管成纤维细胞提取物【Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblast Derivatives】 大鼠支气管成纤维细胞提取物是从大鼠支气管成纤维细胞提取的,大鼠支气管成纤维细胞从正常大鼠支气管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 大鼠支气管成纤维细胞提取物价格 | 英文名称 | Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblast Derivatives | 货号 | EYX99208 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 己烯雌酚Elisa检测试剂盒96Allyl phenoxyacetate74934苯氧乙酸烯丙酯 依维菌素Elisa检测试剂盒962-Allylphe74512-烯丙基酚 醋酸甲羟孕酮Elisa检测试剂盒962-Amino'-chloro-nitro benzophenone1162-氨基-硝基'-氯二苯甲酮 19-去甲睾酮Elisa检测试剂盒966-Chloroguanine riboside04/7/16-氯鸟嘌呤核苷 孕酮Elisa检测试剂盒96价格:¥1 / 5 mg中文名:4-(1H,2,4-三氮唑-基甲基)苯胺别名: HumanEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA试剂盒人内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒规格:96T/48T (R)-4-Methoxydalbergione 中文名:(R)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 HumanEndotheliallipase,ELELISA试剂盒人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒规格:96T/48T (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 78606-95-9 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO HumanEndostatin,ESELISA试剂盒人内皮抑素(ES)ELISA试剂盒规格:96T/48T (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-(+)-4-苄基-3-丙酰-2-恶唑烷酮 分子式:C13H15NO3 Humanendomorphin-2,EM-2ELISA试剂盒人内肽-2(EM-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 90719-32-7 中文名:(S)-4-苄基-2-噁唑烷酮 分子式:C10H11NO2 HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA试剂盒人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T (S)-4-Methoxydalbergione 中文名:(S)-4-甲氧基黄檀醌 分子式:C16H14O3 外消旋西替利嗪N氧化物(非对映) rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 英文名称RatDHEA-SELISAKit大鼠去氢表雄同(DHEA-S)规格:96T/48T (3R,5S)氟伐他汀钠盐 (3S,5R) Fluvastatin Salt 质量规格:美国进口 英文名称Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠双氢睾同(DHT)规格:96T/48T (3R,5S)-氟伐他汀钠盐 (3R,5S)-Fluvastatin Salt 质量规格:美国进口 英文名称Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠双氢睾同(DHT)规格:96T/48T 氟伐他汀 Fluvastatin 质量规格:美国进口 英文名称RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)规格:96T/48T 克林沙星盐酸盐 Clinafloxacin Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)规格:96T/48T 4-羟基左旋咪唑 4-Hydroxy Levamisole 质量规格:美国进口 英文名称RatDPDELISAKit大鼠脱氧吩(DPD)规格:96T/48T 氯米帕明N氧化物 Clomipramine N-Oxide 质量规格:美国进口 英文名称RatDPP4ELISAKit大鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA试剂盒规格:96T/48T N-去甲基氯米帕明盐酸盐 N-Desmethyl Clomipramine Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯吡格雷 Clopidogrel 质量规格:美国进口 英文名称RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 氯吡格雷标记d4 Clopidogrel Labeled d4 质量规格:美国进口 英文名称RatEndothelialniicoxidesyhase3ELISAKit大鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)规格:96T/48T 大鼠支气管成纤维细胞提取物价格人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit Capecitabine 中文名:卡培他滨 分子式:C15H22FN3O6 人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISAKit Tigecycline 中文名: 分子式:C29H39N5O8 人抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISAKit Tigogenin 77-60-1 中文名:剑麻皂素 分子式:C27H44O3 度:98.0% 关键词: 毛地黄属; 万年兰属; 螺甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 人抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISAKit Tigogenin 77-60-1 中文名:剑麻皂素 分子式:C27H44O3 人抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISAKit Tigogenin 中文名:剑麻皂素 分子式:C27H44O3 |