大鼠肺成纤维细胞提取物

大鼠肺成纤维细胞提取物【Rat Lung: Normal Lung Fibroblast Derivatives】

大鼠肺成纤维细胞提取物是从大鼠肺成纤维细胞提取的，大鼠肺成纤维细胞从正常大鼠肺组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项：

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

脊髓灰质炎病毒2型单重荧光PCR检测试剂盒48Sitagliptin phosphate6546718无水磷酸西他列汀

脊髓灰质炎病毒3型单重荧光PCR检测试剂盒484-Difluoromethoxy-hydroxybenzaldehyde15138

小双节RNA病毒单重荧光PCR检测试剂盒483-Cyclopropylmethoxy-difluoromethoxybenzoic acid16212

甲型肝炎（HAV）病毒单重荧光PCR检测试剂盒485-Chloro-nitrobenzoic acid25165

肠道病毒通用（EV-U）单重荧光PCR检测试剂盒482-Methyl-nitrobenzoic acid19751
humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember12,EAR12ELISA试剂盒人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员12(EAR12)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (1R,2S)-1-Amino-2-indanol  136030-00-7  中文名：(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO 

humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember1,EAR1ELISA试剂盒人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (1R,2S)-2-Ami,2-diphenylethanol  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO 

Humanenkephalin,ENKELISA试剂盒人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  131685-53-5  中文名：(R)-(-)-4-苄基-3-丙酰基-2-恶唑烷酮  分子式：C13H15NO3 

Humanendotoxin,ETELISA试剂盒人内(ET)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  中文名：(R)-(+)-1,1'-联-2-萘酚  分子式：C20H14O2 

humanEndothelin1,ET-1ELISA试剂盒人内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  102029-44-7  中文名：(R)-4-苄基-2-恶唑烷酮  分子式：C10H11NO2
外消旋心得安-d7  rac Propranolol-d7  质量规格：美国进口 英文名称RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)规格：96T/48T

5-羟基盐酸心得安  5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格：96T/48T

(R)-4-羟基盐酸心得安  (R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格：96T/48T

(S)-4-羟基盐酸心得安  (S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格：96T/48T

(+/-)-4-羟基盐酸心得安  (+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格：96T/48T

(+/-)-4'-羟基硫酸心得安  (+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate  质量规格：美国进口 英文名称TGF-β1转移生长因子-β1规格：96T/48T

4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸   4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide  质量规格：美国进口 英文名称ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)规格：96T/48T

S(-)-盐酸心得安  S(-)-Propranolol • HCl  质量规格：美国进口 英文名称TIMP-1金属蛋白酶组织抑制因子-1规格：96T/48T

雷洛昔芬-d4  Raloxifene-d4  质量规格：美国进口 英文名称谷氨酸脱羧酶抗体规格：96T/48T

雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸  Raloxifene 6-Glucuronide  质量规格：美国进口 英文名称核糖体、P抗体、IgG/M/A规格：96T/48T
大鼠肺成纤维细胞提取物人抗糖蛋白抗体(GP)ELISAKit     Timosaponin AIII  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13 

人抗鼠抗体(HAMA)ELISAKit     3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  85175-59-3  中文名：  分子式：C15H18ClNO3 

人抗鼠抗体(HAMA)ELISAKit     3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  中文名：  分子式：C11H13N3S  度：98.0%

人抗人类缺陷病毒抗体(HIV)ELISAKit     3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride  2421-28-5  中文名：3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐  分子式：C17H6O7 

人抗缪勒管激素(AMH)酶联吸附测定试剂盒   Human AMH (Ai-Mullerian Hormone) ELISA Kit                   2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C26H52O3