大鼠小肠平滑肌细胞提取物【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives】 大鼠小肠平滑肌细胞提取物是从大鼠小肠平滑肌细胞提取的,大鼠小肠平滑肌细胞从正常大鼠小肠组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 大鼠小肠平滑肌细胞提取物 | 英文名称 | Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives | 货号 | EYX99203 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 甲氧苄氨嘧啶 ELISA试剂盒96TMethyl 4-O-feruloylquinate19572 西马特罗 ELISA试剂盒96TMethyl 4'-methylbiphenyl-carboxylate1147724 氟甲喹 ELISA试剂盒96TMethyl 4'-bromomethyl biphenyl-carboxylate1147728 恩诺沙星 ELISA试剂盒96TMethyl 3-cyclopropyl-oxopropionate322495 蜂蜜总抗 ELISA试剂盒96TMethyl 3-amino-[[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]amino]benzoate13648 HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 12-Aminolauric acid 693-57-2 中文名:12-氨基十二酸 分子式:C12H25NO2 度:98.0% Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人球蛋白轻链kappa抗体(κ-IgLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138213-63-5 中文名: 分子式:C31H38O18 度:98.0% 关键词: Humanisletcellaibody,ICAELISAKit 人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 (-)-Phaselic acid 423170-79-0 中文名: 分子式:C13H12O8 度:98.0% 关键词: Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISAKit 人球蛋白j链(Ig-j)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C29H36O17 度:95.0% Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人球蛋白重链可变区(IgHV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene 3073-87-8 中文名:1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基恶唑基)]苯 分子式:C26H20N2O2 度:% 关键词: 维生素K HPLC≥98% 20mg humandopamine,DAELISAKIT 人多巴胺(DA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 维生素U HPLC≥98% 20mg Humandopaminedecarboxylase,DDCELISAKit 人多巴胺脱羧酶(DDC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 维司那定 HPLC≥98% 20mg Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 伪金丝桃素 HPLC≥98% 20mg Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 伪绵马素 HPLC≥98% 20mg Humandynorphin,DynELISAKit 人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 伪原薯蓣皂苷 HPLC≥97% 20mg HumanElastinELISAKit 人弹性蛋白(Elastin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 卫矛醇 HPLC≥98% 20mg Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 文多灵 HPLC≥98% 20mg HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 沃塔紫杉醇 HPLC≥98% 20mg Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 乌苯美司 HPLC≥98% 20mg HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 大鼠小肠平滑肌细胞提取物人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISAKit 2-Benzylsuccinic acid 3972-36-9 中文名: 分子式:C11H12O4 人谷胱甘肽(GSH)ELISAKit 2-Benzylacrylic acid 中文名: 分子式:C10H10O2 度:98.0% 人干细胞因子受体(SCFR)ELISAKit 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 度:98.0% 人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISAKit 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 人钙离子通道抗体(VGCC)ELISAKit 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 中文名: 分子式:C11H13N3S |