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ELISA透析袋如何使用
点击次数:1047 更新时间:2015-06-03

透析已成为生物化学实验室zui 简便zui常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除 去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品 溶液置入袋内, 将此透析袋浸入水或缓冲液中, ELISA样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留 在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液",袋(膜)外的溶液称为“渗出液"或“透析 液"。

   透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度, 通常是 4℃透析,升高温度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的zui多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的 是美国 Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司的各种尺寸的透析管, 截留分子量 MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量,缩写为 MwCO)通常为 1 万左右。 商品透析袋制成管状,其扁平宽度为 23 mm~50 mm 不等。为防干裂,出厂时都用 10% 的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质 和其它生物活性物质有害,用前必须除去。可先用 50%乙醇煮沸 1 小时,再依次用 50%乙 醇、0.01 mol/LELISA 碳酸氢钠和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗涤,zui后用蒸馏水冲洗即可使用。实 验证明, 50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。

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