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骨髓染色体标本制备
点击次数:774 更新时间:2015-09-09

一、原理

    骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。

    骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养可分短期培养和直接制片法,无论哪种其培养液中均不需加PHA。

二、用品和试剂

    同外周血染色体制备。

三、操作步骤

(一)短期培养法

1.取材、培养:从髂骨取骨髓液0.2—0.5ml,无菌注入装有5ml培养液的培养瓶中,37℃培养23—25小时后,加入秋水仙碱(终浓度为0.07μg/ml),继续培养3—4小时,收获。

2.染色体制片:低渗、固定、制片及染色同实验一。细胞

(二)直接制备法

1.从髂骨抽取0.3—0.5ml,立即注入浓度为0.07μg/ml的秋水仙碱的生理盐水5ml中,以吸管轻轻吸动,将骨髓中脂肪颗粒充分吸掉,1000rpm
离心8分钟,弃上清。

2.加入同样浓度的秋水仙碱生理盐水2—3ml,室温放置2—3小时,离心弃上清。

3.染色体制片:低渗、固定、制片及染色同外周血染色体制备。细胞

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