设为主页  |  加入收藏
新闻动态
·黄原胶液体发酵培养基(葡萄糖)​优惠活动
·今天给大家介绍人VEGFR3 Elisa检测试剂盒的优惠活动
·五一放假通知
·人成骨细胞​的优惠活动
·兔一氧化化氮ELISA检测试剂盒​优惠活动正在如火如荼地进行中
·猪PD-1 ELISA检测试剂盒优惠活动
·人脐静脉平滑肌细胞鉴定试剂盒清明优惠活动来啦!
产品搜索
产品目录
ELISA试剂盒
细胞
菌种
血清
培养基
生化试剂
标准品/对照品
抗体
ATCC细胞
PCR试剂盒
elisa检测试剂盒
质粒
定量PCR试剂盒
细胞培养
联系我们
联系我们
上海一研生物科技有限公司
地址:上海闵行区沪闵路6269号银霄大厦B102
电话:021-69985169
邮编:201102
传真:
联系人:高丽琴
手机:13611928337
技术文章
·372-75-8瓜氨酸准品、对照品​的问题
·土壤木质素过氧化物酶(SLiP)测试盒测定操作
·人Ⅱ型胶原代细胞C2CELISA检测试剂盒操作注意事项
·烟曲霉探针法荧光定量PCR试剂盒标准操作步骤
·糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体抗体免疫荧光技术的实验步骤
 
 
技术文章 Article 您现在的位置:首页 > 技术文章
人直肠组织提取物操作要点
点击次数:153 更新时间:2024-03-12

人直肠组织提取物操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。


本站推荐产品:主营产品:PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。
上海一研生物科技有限公司(www.y-reagent.com) 版权所有 总访问量:372668 地址:上海闵行区沪闵路6269号银霄大厦B102 邮编:201102
电话:021-69985169 传真: 手机:13611928337 联系人:高丽琴 邮箱:3004994300@qq.com
技术支持:智慧城市网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备14030958号-5
在线客服
021-69985169
13611928337
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
 

智慧城市网

推荐收藏该企业网站