冷冻保存细胞之方法: EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 产品描述: 细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书 形态特性淋巴母细胞样 生长特性悬浮生长 特征特性该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 培养条件RPMI1640(w/oHepes)15%NBS 传代方法1:2传代;5-6天一次 传代情况P2 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测荧光法(-) STR- 同工酶 染色体
 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 注意事项: 1.一般客户拿到EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书后,应该注意什么? 客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。 细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些? (1)客户造成细胞污染,不重发; (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发; (3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; (4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发; (5)细胞培养时经其它处理的,不重发; (6)细胞收到2天内,未告知,不重发; (7)视具体情况而定。 MTF*人微量转铁蛋白规格48T/96T MAP-2*人微管相关蛋白2规格48T/96T MAP-2*人微管相关蛋白2规格48T/96T omentin*人网膜素规格48T/96T AOPP*人晚期氧化蛋白产物规格48T/96T RAGE/AGER*人晚期糖基化终末产物受体规格48T/96T AGEs*人晚期糖基化终末产物规格48T/96T extein*人外显肽规格48T/96T SA*人唾液酸规格48T/96T DUTP*人脱氧尿三磷酸规格48T/96T EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书蛋白酶活化受体4/前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗原PAR4(protease-activatedreceptor4)蛋白酶活化受体4/前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗原0.5mgPAR4(protease-activatedreceptor4 磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗原p-Arhgef2/GEF-H1(Rhoguaninenucleotideexchangefactor2,pSer810)磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗原0.5mgp-Arhgef2/GEF-H1(Rhoguaninenucleotideexchangefactor2,pSer810 PARP(polyADP-ribosepolymerase)N-Terminus多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)0.5mgPARP(polyADP-ribosepolymerase 多腺苷二磷酸多聚酶抗原PARP(polyADP-ribosepolymerase)多腺苷二磷酸多聚酶抗原0.5mgPARP(polyADP-ribosepolymerase Parvalbumin微白蛋白/细小清蛋白抗原Parvalbumin微白蛋白/细小清蛋白抗原0.5mgParvalbumin微白蛋白/细小清蛋白抗原 配对盒基因8抗原PAX8(Pairedboxgene8)配对盒基因8抗原0.5mgPAX8(Pairedboxgene8 配对盒基因9抗原PAX9(Pairedboxgene9)配对盒基因9抗原0.5mgPAX9(Pairedboxgene9 内脂素/B细胞克隆增强因子PBEF(CT)内脂素/B细胞克隆增强因子0.5mgPBEF(CT 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908说明书货期短,价格优,售后齐全。点击进入了解更多转化细胞。 |