细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养货期短,价格优,售后齐全。点击进入了解更多肿瘤细胞。 产品描述: 细胞名称 人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养 形态特性上皮样;多角 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞系源自一名64岁白人女性的子宫内膜肿瘤组织,由GRRichardson于1984年建系。细胞染色体为非整倍体,数目范围在51-66之间。裸鼠植瘤后,其肿瘤标本在电镜下显示,细胞间见紧密相连,细胞表面具有微绒毛。其 态特征与孕激素刺激后的子宫内膜相似。 培养条件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 传代方法1:3传代,2-3天传一代 传代情况C11 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测阴性 STRSTR鉴定 同工酶 染色体
注意事项: 1.一般客户拿到人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养后,应该注意什么? 客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。 细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些? (1)客户造成细胞污染,不重发; (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发; (3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; (4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发; (5)细胞培养时经其它处理的,不重发; (6)细胞收到2天内,未告知,不重发; (7)视具体情况而定。 *Anti-Gab1/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠接头蛋白Gab1抗体IgG规格:0.2ml *Anti-Gab2/FITC荧光素标记接头蛋白Gab2抗体IgG规格:0.2ml *Anti-Phospho-Gab1(Tyr627)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化接头蛋白Gab1抗体IgG规格:0.2ml *Anti-Phospho-Gab1(Tyr659)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化接头蛋白Gab1抗体IgG规格:0.2ml *Anti-GABA-ARAlpha1/FITC荧光素标记γ1氨基丁酸受体α1抗体IgG规格:0.2ml *Anti-GABA-B-R1/FITC荧光素标记抗g-氨基丁酸B1受体抗体IgG规格:0.2ml *Anti-GABA/FITC荧光素标记兔抗γ1氨基丁酸抗体IgG规格:0.2ml *Anti-GABAB2/FITC荧光素标记抗g-氨基丁酸B2受体抗体IgG规格:0.2ml *Anti-phospho-GAB2(Ser623)/FITC荧光素标记磷酸化接头蛋白Gab2抗体体IgG规格:0.2ml *Anti-phospho-GAB2(Tyr452)/FITC荧光素标记磷酸化接头蛋白Gab2抗体IgG规格:0.2ml 人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养*Anti-Phospho-Ack1(Tyr326)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗体IgG规格:0.2ml *Anti-ACTH1-39/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠ACTH抗体IgG规格:0.2ml *Anti-ACTH(7-23)/FITC荧光素标记促肾上腺皮质激素(7-23)抗体IgG规格:0.2ml *ACTH(18-39)/FITC荧光素标记ACTH(18-39)抗体IgG规格:0.2ml *Anti-ActinAlpha/Alpha-SMA/FITC荧光素标记Actinα蛋白抗体IgG规格:0.2ml *Anti-ActinAlpha/Alpha-SMA/RBITC红色荧光素标记肌动蛋白α抗体IgG规格:0.2ml *Anti-Beta-Actin/FITC荧光素标记β-肌动蛋白抗体IgG规格:0.2ml *Anti-F-Actin/FITC荧光素标记抗F-肌动蛋白抗体规格:0.2ml *Anti-Alpha-ACTN4/FITC荧光素标记抗α-辅肌动蛋白4抗体IgG规格:0.2ml *Anti-ADAM-TS1/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型抗体IgG规格:0.2ml 冷冻保存细胞之方法: 人子宫内膜腺癌细胞;KLE培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |