【中文名称】： TF 猪组织因子酶联免疫试剂盒 

【英文名称】：TF ELISA Kit 

【产品规格】：96T/48T。

【保存条件】：2-8℃低温保存

【保质期】：6个月，所有试剂盒均提供批次。

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被目标抗原/抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，在酸作用下最终变为黄色。颜色深浅与样本中目标物浓度呈正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），即可换算得到样本浓度。

试剂准备

试剂盒从2-8℃环境取出后，室温平衡20分钟再使用。

20×浓缩洗涤液按1:20比例稀释：1份浓缩洗涤液加入19份蒸馏水，充分混匀。若浓缩洗涤液出现结晶，37℃水浴加热至结晶溶解后再稀释使用。

所有液体组分使用前充分摇匀，避免局部浓度不均。

样本收集与保存

‌血清样本‌：用无热原、无内毒素试管采集血液，避免细胞刺激，3000转离心10分钟，快速分离血清与红细胞。

‌血浆样本‌：采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝管采集，3000转离心30分钟取上清。

‌细胞上清样本‌：3000转离心10分钟，去除细胞颗粒和聚合物，取上清检测。

‌组织匀浆样本‌：将组织按比例加入生理盐水充分捣碎，3000转离心10分钟取上清。

‌样本保存‌：未及时检测的样本按单次用量分装，-20℃冻存，严格避免反复冻融；室温下解冻时需充分混匀。

标准化操作步骤

从平衡至室温的铝箔袋中取出所需数量的板条，剩余未使用板条立即放回自封袋，密封后2-8℃干燥保存。

设置标准品孔、待测样本孔和空白孔：标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加任何液体。

除空白孔外，所有标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱中温育60分钟。

弃去孔内所有液体，在吸水纸上充分拍干，每孔加满稀释后的洗涤液，静置1分钟后甩去液体，再次拍干，重复洗板5次；也可使用自动洗板机，每孔注入洗液350μL，浸泡1分钟，洗板5次。

每孔依次加入底物A液、底物B液各50μL，轻轻混匀，37℃避光环境下孵育15分钟。

每孔加入终止液50μL，15分钟内用酶标仪在450nm波长处测定各孔的OD值。