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 细胞名称 人肾透明细胞癌细胞;Caki-2培养
 形态特性上皮细胞样
 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞源自一位69岁白人男性的初期肾腺癌组织 培养条件McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS 传代方法1:3~1:6传代,2~3天换液一次 传代情况P31 冻存条件基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法(-) STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10;D16S539:9,13;D18S51:17;D19S433:13,14;D21S11:27,31;D2S1338:17,20;D3S1358:14;D5S818:11;D7S820:12;D8S1179:10;FGA:22;TH01:6;TPOX:9,11;vWA:16,17; 同工酶 染色体亚五倍体,亚六倍体
  冷冻保存细胞之方法:
 人肾透明细胞癌细胞;Caki-2培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
 细胞培养操作规程:
 一.培养基及培养冻存条件准备:
 1)人肾透明细胞癌细胞;Caki-2培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
 二.细胞处理:
 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 MR*人甘露糖受体规格48T/96T
 MBLR*人甘露糖凝集素受体规格48T/96T MBP/MBL*人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素规格48T/96T Mannose*人甘露糖规格48T/96T CG*人甘胆酸规格48T/96T SCFR*人干细胞因子受体规格48T/96T SCF/MGF*人干细胞因子/肥大细胞生长因子规格48T/96T IP-10/CXCL10*人干扰素诱导蛋白10规格48T/96T IRF*人干扰素调节因子规格48T/96T CNR-1*人钙粘蛋白相关的神经受体1规格48T/96T人肾透明细胞癌细胞;Caki-2培养*Anti-phospho-Bim(Ser87)磷酸化细胞死亡调解子抗体规格:0.1ml
 *Anti-phospho-Bim(Ser55)磷酸化细胞死亡调解子抗体规格:0.1ml *Anti-phospho-Bim(Ser69)磷酸化细胞死亡调解子抗体规格:0.1ml *Anti-BIRC5/Survivinvariant细胞凋亡抑制因子5抗体规格:0.2ml *Anti-BKchannelBK通道蛋白抗体规格:0.1ml *Anti-BKCachannels钙激活钾通道蛋白抗体规格:0.2ml *Anti-Bmi1/PCGF4组蛋白相关Bmi1抗体规格:0.2ml *Anti-BLNKB淋巴细胞连接蛋白抗体规格:0.2ml *Anti-Phospho-BLNK(Tyr96)磷酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体规格:0.1ml *Anti-BMP2骨形态发生蛋白2抗体规格:0.1ml注意事项:
 1.一般客户拿到人肾透明细胞癌细胞;Caki-2培养后,应该注意什么?
 客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
 收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
 细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
 (1)客户造成细胞污染,不重发;
 (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
 (3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
 (4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
 (5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
 (6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
 (7)视具体情况而定。
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