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产品描述：
细胞名称 人成巨核细胞白血病细胞；MEG-01培养
形态特性淋巴母细胞样 生长特性悬浮生长 特征特性MEG-01细胞株源自一位CML患者成巨核细胞转换期的骨髓细胞。细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa，高酸-Schiff(PAS)反应，α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶阳性。髓过氧化物酶，α丁酸萘酯酶，氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和碱性磷酸酶阴性。用单克隆抗体BA-1(抗B细胞，粒性白细胞)，HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗单核细胞，血小板)染色成阳性。其他淋巴和骨髓类抗体成阴性。 培养条件RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10% 传代方法1:2。3天内可长满。 传代情况PN5 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测阴性 STR 同工酶 染色体
冷冻保存细胞之方法：
人成巨核细胞白血病细胞；MEG-01培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人成巨核细胞白血病细胞；MEG-01培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
*Anti-Bcl-10/CLAP/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Bcl-10(phosphoSer218)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-10抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Bcr/CD3D/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠T淋巴细胞受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化T淋巴细胞受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21/FITC荧光素标记三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Bdkrb2/B2R/FITC荧光素标记缓激肽B2受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-BDNF/FITC荧光素标记BDNF蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-BECN1/FITC荧光素标记一种抑癌基因抗体IgG规格：0.2ml *Anti-EpCAM/CD326/FITC荧光素标记上皮细胞特异性EpCAM/CD326蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Beta-casein(Beta-casein)/FITC荧光素标记β-酪蛋白(抗体)IgG规格：0.2ml
人成巨核细胞白血病细胞；MEG-01培养*Anti-LI-cadherin肝肠钙粘连蛋白抗体规格：0.2ml *Anti-PCNA增殖细胞核抗原抗体规格：0.1ml *Anti-PCNA增殖细胞核抗原抗体规格：0.1ml *ANti-PDCD4凋亡相关蛋白4抗体规格：0.1ml *Anti-PCNA-ProliferationMarker增殖细胞核抗原抗体规格：0.1ml *Anti-TFAR19/PDCD5凋亡相关蛋白TFAR19抗体规格：0.1ml *Anti-PCNA-ProliferationMarker增殖细胞核抗原抗体规格：0.1ml *Anti-phosphos-PCNA(Tyr211)磷酸化增殖细胞核抗原抗体规格：0.1ml *Anti-PCX/PODXL足细胞特异蛋白抗体规格：0.2ml *Anti-PDE4D磷酸二酯酶4D抗体规格：0.2ml
注意事项：
1.一般客户拿到人成巨核细胞白血病细胞；MEG-01培养后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 |
