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产品描述：
细胞名称 人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1培养
形态特性上皮细胞 生长特性贴壁生长 特征特性DLD-1是1977-1979年间D.L.Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNAfingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-15(CCL-225)相似，说明这两者是来自同一个人的不同克隆。他们的遗传起源可通过DNAfingerprinting证实，但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记*改变或数目上*改变。细胞的CSAp阴性(CSAp-)。DLD-1细胞的p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个C-> 培养条件RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10% 传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况PN5 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STRAmelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,12；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19 同工酶 染色体
冷冻保存细胞之方法：
人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
*Anti-CG6856/CG6856-PA/FITC荧光素标记兔抗果蝇CG6856-PA抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CGB/FITC荧光素标记嗜铬粒素B抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CGP-39/YKL-40/FITC荧光素标记软骨糖蛋白39抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CGRP/FITC荧光素标记降钙素基因相关肽抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ChAT/FITC荧光素标记ChAT抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CHK1/FITC荧光素标记抗细胞周期检测点激酶1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CHK2/Cds1/FITC荧光素标记抗细胞周期检测点激酶2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-CHK2(Thr68)/FITC荧光素标记磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Chloramphenicol/FITC荧光素标记抗氯霉素抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ChRM1/FITC荧光素标记毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体IgG规格：0.2ml
人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1培养*Anti-SLC39A6SLC39A6抗体规格：0.2ml *Anti-Slug锌指转录因子Slug抗体规格：0.2ml *Anti-SLC40A1/FPN1细胞膜铁转运蛋白SLC40A1抗体规格：0.1ml *Anti-SLC44A1/CD92溶质转运蛋白家族44成员1抗体规格：0.2ml *Anti-Smad1细胞信号转导分子Smad-1抗体规格：0.2ml *Anti-Phospho-Smad1(Ser206)磷酸化细胞信号转导分子Smad-1抗体规格：0.1ml *Anti-Phospho-Smad1/5(Ser463/465)磷酸化细胞信号转导分子Smad-1/5抗体规格：0.1ml *Anti-Smad2/3细胞信号转导分子Smad-2/3抗体规格：0.1ml *Anti-phospho-Smad2(Ser465)磷酸化Smad2抗体规格：0.1ml *Anti-Smad4Smad4抗体规格：0.2ml
注意事项：
1.一般客户拿到人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1培养后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 |
