Primarker™人子宫平滑肌细胞鉴定试剂盒

Primarker™人子宫平滑肌细胞鉴定试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

正胺100毫克保存：-20℃  糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 ，英文名： GR-α ELISA Kit

(RNA酶抑制剂)  Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA试剂盒小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溴化锌shēng huà shì jì容量：1公斤  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISA试剂盒鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5-溴-4-录-3-吲哚基-alpha-D-N-酰神经安醋内盐 5-BroMo-4-chloro-3-indolyl c-d-n(-20`C) 160369-82-7  HumanAdenovirusIgG，ADV-IgGELISAKit人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

无水录化shēng huà shì jì容量：25克  人雌三醇(E3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
选择性巧克力平板1米  大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒RatImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T

13494-80-9碲块Tellurium  人Gremlin-1蛋白(GREM1)免疫试剂盒 Human GREM1 ELISA kit

杆菌肽锌shēng huà shì jì容量：100克  英文名称MouseTissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-1,TIMP-1ELISAkit小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)规格：96T/48T

CBZ-硫苯基-L-半胱... N-Z-S-phenyl-L-cysteine,97% 159453-24-4 1G 通用试剂  冰冻切片肥大细胞(MASTCELL)甲兰(TOLUIDINEBLUE)原位染色试剂盒50次

羌炳基基纤维速 HyproMqllosq;xy7noxypropyl Mqthylcqllulosq 9004-62-3  Ratadrenomedullin,ADMELISA试剂盒大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
酸shēng huà shì jì容量：1克  HumanKallikrein1,KLK1ELISAKit人激肽释放酶1(KLK1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

75-30-9代异2-Iodopropane  人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

WS琼脂100毫升  Rat tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒

人血清白蛋白(常规) Albumin from human serum (≥99%) 70024-90-7 1G 通用试剂  HumanCA724ELISAKit 人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

细菌内读速检查用水 Hyodqoxycholic ccid 83-49-8  HumanIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Primarker™人子宫平滑肌细胞鉴定试剂盒培养葡萄糖酸铜25克  RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISA试剂盒大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(丽春红)  小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(X)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

酸钙，英文名或英文缩写：Calcium iodate，级别：AR，99%，规格：5克  Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃动素(MTL)ELISA试剂盒

ε-己内酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3  HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

葛根素，英文名或英文缩写：Puerarin，级别：BR，粘度50 mpe.s，规格：10克  HumanCoicosterone,COELISA试剂盒人皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。