小鼠子宫颈组织提取物培养

小鼠子宫颈组织提取物【Cervix: Normal Mouse Cervix Derivatives】

子宫颈位于子宫下部，近似圆锥体。其上端与子宫体相连，下端深入。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠子宫颈组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

G418溶液mg/ml ml3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone1136811

Gentamicin solution 庆大霉素溶液5×1ml3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol071254

Goldview染色液1ml3-(Hydroxymethyl)-nitro-(4-octylphenyl),4-butanediol8998229

Guanidine hydrochloride solution 6M 盐酸胍溶液0ml3-(Bromomethyl)-cyclopropyl-(4'-fluorophenyl)quinoline15576

GUS染色试剂盒ml3-(Boc-Amino)piperidine99568
Decanedioic acid  111-20-6  中文名：  分子式：C10H18O4    组织MKK6激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名：  分子式：C50H93NO9    humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISAKit人0脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Momor-cerebroside I  606125-07-9  中文名：  分子式：C48H93NO10    神经生长因子(NGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rengyol  93675-85-5  中文名：连翘环己醇  分子式：C8H16O3    Rat thrombomodulin (TM) ELISA Kit 大鼠血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒

Cleroindicin D  189264-45-7  中文名：  分子式：C8H12O4    Humanoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
扑热息痛(标准品)  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  质量规格：HPLC>99%,标准品 大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)试剂盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit

奥拉帕尼  Olaparib,AZD2281,KU0059436  质量规格：≥98%,选择性的PARP1/2抑制剂 大鼠酪氨酸羟化酶(TH)试剂盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit

奎尼丁  Quinidine  质量规格：>98.0%,BR 大鼠类风湿因子(RF)试剂盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit

单甘油酯/甘油一酯  Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol  质量规格：单酯含量大于40% 大鼠类5α还原酶1(SRD5A1)试剂盒 Rat Steroid 5-Alpha-Reductase 1,SRD5A1 ELISA Kit

甘油单油酸酯/单油酸甘油酯  Monoolein  质量规格：度≥50%,油状液体 大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA检测试剂盒RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 96T/48T

ADP.Na2; 5'-二腺苷二钠/腺苷-5'-二二钠盐  Adenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna)  质量规格：>95.0%,BR 大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)试剂盒 Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit

ADP; 5'-二腺苷/腺苷-5'-二  Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP  质量规格：>95.0%,BR 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA检测试剂盒RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 96T/48T

沙格列汀/沙克列汀  Saxagliptin monohydrate  质量规格：>98%,BR,单水合物 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)试剂盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit

更昔洛韦  Ganciclovir  质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养 大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)试剂盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit

更昔洛韦(标准品)  Ganciclovir  质量规格：HPLC>98.5%,标准品 大鼠细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA检测试剂盒Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 96T/48T
小鼠子宫颈组织提取物培养球蛋白E(IgE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  1,2-Cyclohexanedicarboximide  7506-66-3  中文名：  分子式：O2  度：98.0%  关键词： 

球蛋白Aelisa试剂盒   球蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   球蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：球蛋白A试剂盒、球蛋白A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%

球蛋白Aelisa试剂盒   球蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   球蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：球蛋白A试剂盒、球蛋白A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S  度：98.0%

球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒              8-Hydroxyodoroside A  中文名：  分子式：C30H46O8 

球蛋白A(IgA)ELISAKit     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  547-91-1  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S  度：98.0%  关键词：