大鼠肠静脉组织提取物胞说明书

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大鼠肠静脉组织提取物胞【Rat Intestinal: Normal Intestinal Vein Derivatives】

大鼠肠静脉是肝门静脉的主要属支，分为肠系膜上静脉和肠系膜下静脉。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠肠静脉组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

细胞培养方法；

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项；

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

CHAPSO   1g2,2'-Biphe692,2'-酚

CHES   g/25g2,2'-Bicinchoninic acid124532,2'-二辛可宁酸

Chitin 几丁质   g 2,2'-Anhydro-methyluridine2242362,2'-O-脱水-甲基尿嘧啶核苷

Chitosan壳聚糖   25g 2-(Phenylmethoxy)-naphthalene61322-萘酚苄基醚

Chloramphenicol氯霉素   5g 2-(Morpholinodithio)benzothiazole9522-(4-吗啉基二硫代)苯并噻唑
Conduritol A  526-87-4  中文名：牛弥菜醇A  分子式：C6H10O4    瘦素(LEP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Neochlorogenic acid  906-33-2  中文名：新绿原酸  分子式：C16H18O9    Human fibromodulin (fgl2) ELISA Kit 人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒

Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O    HumanCyclosporineA,CsAELISAKit 人环孢素A(CsA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Ethyl β-D-ribo-hex-3-ulopyranoside  104953-08-4  中文名：  分子式：C8H14O6    Humandermatansulfate,DSELISA试剂盒人皮肤素(DS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6-O-Feruloylglucose  137887-25-3  中文名：6-O-阿魏酰葡萄糖  分子式：C16H20O9    组织L-乳酸比色法定量检测试剂盒20次
纳他霉素(标准品)  Natamycin,Pimaricin  质量规格：含量测定,标准品 大量腺病毒树脂法高级化试剂盒1

硝苯地平  Nifedipine  质量规格：>99%,CP,AR 大量真菌/酵母细胞基因组DNA化试剂盒10

硝苯地平（标准品）  Nifedipine  质量规格：HPLC>98%,标准品 大量植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒5(20克/)

尼莫地平  Nimodipine  质量规格：>98.5%,可用于细胞培养 大量植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒5(20克/)

尼莫地平（标准品）  Nimodipine  质量规格：HPLC>98%,标准品 大量质粒DNA氯化铯化试剂盒10

硝唑尼特  Nitazoxanide  质量规格：>99% 大量总RNA氯化铯化试剂盒10

硝唑尼特(标准品)  Nitazoxanide  质量规格：>99%,标准品 大麦β-淀粉酶活性DNS比色法定量检测试剂盒20

寡霉素A  Oligomycin A  质量规格：>95%,美国进口原装 大麦β-淀粉酶活性PNPG5酶偶联比色法定量检测试剂盒20

盐酸奥洛他定  Olopatadine HCl  质量规格：BR,细胞培养级，度大于99% 大麦叶片原生质细胞分离试剂盒5

盐酸奥洛他定(标准品)  Olopatadine HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品 大米蛋白化学萃取试剂盒20(10克/)
大鼠肠静脉组织提取物胞说明书豚鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 ，英文名： CRP ELISA Kit  2,4-Dihydroxypyridine  626-03-9  中文名：  分子式：C5H5NO2  度：98.0%  关键词： 

豚鼠Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)ELISA试剂盒 ，英文名： KL-6 ELISA Kit  2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名：2,4-双(α,α-二甲基苯甲基)苯酚  分子式：C24H26O  度：98.0%

豚鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit  2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6  度：98.0%  关键词： 

兔组织因子途径抑制物elisa试剂盒   兔组织因子途径抑制物试剂盒   规格型号：96T/48T   兔组织因子途径抑制物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔组织因子途径抑制物试剂盒、兔组织因子途径抑制物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Allopurinol  315-30-0  中文名：别嘌醇  分子式：C5H4N4O 

兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒     Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2  度：98.0%  关键词：

注意事项；

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。