人体膀胱癌组织源细胞说明书

人体膀胱癌组织源细胞【Cancer: Human Bladder Cancer Derivatives】

膀胱癌是发生于膀胱的癌病类疾病，泛指各种出自膀胱的恶性肿瘤，常见的膀胱癌细胞来自膀胱内面黏膜表皮，是一种移行上皮细胞，贴壁生长，具有无限增殖能力，丧失接触抑制现象，癌细胞间粘着性减弱。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体膀胱癌组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

N6-异戊烯基腺嘌呤溶液（2ip）5×1ml2''-O-Acetylsprengerinin C1273

Neomycin solution 新霉素溶液5×1ml2-n-Propyl-methyl-(1-methylbenzimidazole-yl)benzimidazole1526282

Penicillin G Na Solution 青霉素G钠盐溶液 mg/ml5×1ml 2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate1587352-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯

Penicillin-Streptomycin Solution 0×青链霉素溶液0ml2-Methylsulfanylpyrimidin(3H)-one575

Penicillin-Streptomycin Solution 青链霉素溶液(0×)0ml2-Methylanthraquinone8442-甲基蒽醌
Dimethylolurea  中文名：双羟甲脲  分子式：C3H8N2O3    猪水通道蛋白4（AQP4）ELISA试剂盒  

Dihydrotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3    猪瘦素(LEP)ELISA试剂盒  

Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氢洋川芎内酯C  分子式：C12H14O3    猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒  

Dihydroisotanshinone II  中文名：  分子式：C18H14O3    猪食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒           

Dihydroisotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3    猪髓0脂碱性蛋白elisa试剂盒   猪髓0脂碱性蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   猪髓0脂碱性蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪髓0脂碱性蛋白试剂盒、猪髓0脂碱性蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
羟乙基纤维素(20000~30000 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  质量规格：粘度20000~30000 mpa.s 人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)试剂盒 Human iFABP ELISA Kit

羟乙基纤维素(5500-6500 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  质量规格：粘度5500-6500 mpa.s 人超0酸化微管相关蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)试剂盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit

羟乙基纤维素(40~60 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  质量规格：粘度40~60 mpa.s 人超抗原(Sag)ELISA检测试剂盒Humansupperaigen,SagELISAKit 96T/48T

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)  Isopropyl β-D-thiogalactoside  质量规格：>98%,BR 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit

甘露糖；D-甘露糖  D-Mannose  质量规格：>99%,BR 人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)试剂盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit

D-甘露糖(标准品)  D-Mannose  质量规格：HPLC≥98%，标准品 人超敏热休克蛋白60(HSP-60)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit

N-辛酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-8)  N-Octanoyl-N-methylglucamine  质量规格：≥97% ,进分 人超敏热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit

N-癸酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-10)  N-Decanoyl-N-methylglucamine   质量规格：>98%,BR 人巢蛋白1(NID1)试剂盒 Human Nidogen 1,NID1 ELISA Kit

辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷  n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside  质量规格：>98%,BR 人成骨生长肽(OGP)ELISA检测试剂盒HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISAKit 96T/48T

D-绵子糖五水；蜜三糖五水  D(+)-Raffinose pentahydrate  质量规格：>98%,BR 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)试剂盒 Human FGF10 ELISA Kit
人体膀胱癌组织源细胞说明书兔子催乳素elisa试剂盒   兔子催乳素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子催乳素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子催乳素试剂盒、兔子催乳素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S 

兔子催乳素elisa试剂盒   兔子催乳素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子催乳素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子催乳素试剂盒、兔子催乳素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子催乳素(PRL)ELISA试剂盒     6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%

兔子催乳素(PRL)ELISAKit                 5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3 

兔子促上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒              6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2