人体胶质瘤组织提取物说明书

人体胶质瘤组织提取物【Cancer: Human Glioma Derivatives】

胶质瘤是发生于神经外胚层的肿瘤，故亦称神经外胚层肿瘤或神经上皮肿瘤。肿瘤起源于神经间质细胞，即神经胶质、室管膜、脉络丛上皮和神经实质细胞，即神经元。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体胶质瘤组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

Neutral Red 中性红   5g(1R,2R)-Amino-inda6613(1R,2R)-氨基-茚醇

Nicotinamide(烟酰胺)   25g(+)-Taddol933799(+),5-双[羟基(二苯基)甲基],2-二甲基,3-二氧戊环

Nicotinic acid(烟酸)   25g(+)-Noe's reagent8724(+)-核欧沃豪斯效应试剂

Ninhydrin 茚三酮   5g (-)-Phaselic acid42319

NP   0ml (-)-Noe's Reagent319(-)-核欧沃豪斯效应试剂
Dioxopromethazine hydrochloride  15374-15-9  中文名：盐酸二氧丙嗪  分子式：C17H21ClN2O2S                  

Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    兔S100A6蛋白   英文名称：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   规格：   48T/96T   英文缩写：   S100A6

Oxytetracycline hydrochloride  2058-46-0  中文名：盐酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9    兔可溶性细胞间黏附分子1   英文名称：   Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   sICAM-1

Flumequine  42835-25-6  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3    兔基质细胞衍化生长因子1a   英文名称：   Rabbit Somal cell Derived Factor 1a   规格：   48T/96T   英文缩写：   SDF1a

Valnemulin hydrochloride  133868-46-9  中文名：盐酸沃尼妙林  分子式：C31H53ClN2O5S    兔超氧化物歧化酶   英文名称：   Rabbit Superoxide Dismase   规格：   48T/96T   英文缩写：   SOD
（标准品）  Hydrocortisone  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA检测试剂盒Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

富马酸伊布利特  Ibutilide fumarate   质量规格：>99%,BR 大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)ELISA检测试剂盒RatLDL-ICELISAKit 96T/48T

富马酸伊布利特(标准品)  Ibutilide fumarate   质量规格：HPLC≥98%,标准品 大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA检测试剂盒Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 96T/48T

硫酸异帕米星  Isepamicine Sulphate  质量规格：含量≥670µg/mg 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA检测试剂盒raesistinELISAKit 96T/48T

蓓萨罗丁;贝沙罗汀  Bexarotene  质量规格：>99% 大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISA检测试剂盒RatAzidothymidine,AZTELISAKit 96T/48T

蓓萨罗丁(标准品)  Bexarotene  质量规格：>99% 大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA检测试剂盒Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit 96T/48T

酮洛芬  Ketoprofen  质量规格：>99%,AR 大鼠多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒Ratdopamine,DAELISAKit 96T/48T

酮洛芬(标准品)  Ketoprofen  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA检测试剂盒RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T

富马酸酮替芬  Ketotifen fumarate  质量规格：>99%,BR 大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA检测试剂盒Ratdopamineanspoer,DATELISAKit 96T/48T

富马酸酮替芬(标准品)  Ketotifen fumarate  质量规格：HPLC>98%,标准品 大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA检测试剂盒Ratcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T
人体胶质瘤组织提取物说明书兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISAKIT     6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  36450-01-8  中文名：  分子式：C29H46O2  度：%  关键词：  豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羟基甲基异茜草素  分子式：C15H10O5  度：97.5%  关键词：  抗氧化; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羟基甲基异茜草素  分子式：C15H10O5 

兔子补体蛋白4(C4)ELISAKit     Adefovir  106941-25-7  中文名：阿德福韦  分子式：C8H12N5O4P 

兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒     6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O  度：98.0%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。