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人体直肠癌组织提取物说明书

人体直肠癌组织提取物说明书
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公司细胞现货供应,人体直肠癌组织提取物说明书质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
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人体直肠癌组织提取物说明书

Cancer: Human Rectum Cancer Derivatives

EYX99358

 

人体直肠癌组织提取物【Cancer: Human Rectum Cancer Derivatives

直肠癌是胃肠道中常见的恶性肿瘤发病率仅次于胃和食管癌是大肠癌的常见部分(占60%左右)绝大多数病人在40岁以上30岁以下者约占15%男性较多见男女之比为2-31,直肠癌是一种生活方式病。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体直肠腺癌组织中高质量的总RNAPCR准备的第一条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRBHIPAA批准的方案进行。所有的产品在

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

细胞培养方法;

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项;

1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2.   加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。

pcomb3展示系统套(3组分)/Glyburide2381格列本脲

表达性宿主菌XL1-Blue0 ul/Gliquidone333425格列喹酮

辅助噬菌体VCSM130 ul/Glimepiride934797格列美脲

噬菌粒pcomb3HSSng/ululGliclazide211878格列齐特

pcomb3HSS展示系统套(3组分)/Glaucogenin C mono-D-thevetoside84914
Docetaxel  114977-28-5  中文名:多西他赛  分子式:C43H53NO14    RabbitAmylinELISAKit兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Irinotecan hydrochloride  100286-90-6  中文名:盐酸伊立替康  分子式:C31H35ClN4O6    豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 ,英文名: IFN-γ ELISA Kit

Aminophylline  317-34-0  中文名:氨茶碱  分子式:C16H24N10O4    Human mast cell yptase (MCT) ELISA Kit 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)ELISA试剂盒

Chlorhexidine acetate  56-95-1  中文名:醋酸氯己定  分子式:C26H38Cl2N10O4    rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Carbasalate calcium  5749-67-7  中文名:卡巴匹林钙  分子式:C19H18CaN2O9    CLIAKitforBeta2-GP1AbIgG(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgG)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgG规格:48T/96T
球松素查尔酮 HPLC98% 5mg rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISA试剂盒兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去甲布拉易林 HPLC98% 5mg Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISA试剂盒兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去甲络石甙元 HPLC98% 5mg Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISA试剂盒兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去甲氧基去乙酰氧基土槿甲酸 B HPLC98% 5mg Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISA试剂盒兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去甲氧基矢车菊黄酮素 HPLC98% 5mg Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA试剂盒兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去羟加利果酸 HPLC98% 5mg RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA试剂盒兔抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去氢克班宁 HPLC98% 5mg Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去氢苦木碱 HPLC98% 5mg RabbitAmylinELISA试剂盒兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去氢鱼藤素 HPLC98% 5mg Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA试剂盒兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T

去氧地胆草素 HPLC98% 5mg RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISA试剂盒兔血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人体直肠癌组织提取物说明书兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit     6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名:6-苄氧基嘌呤  分子式:C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒     6-Aminouracil  873-83-6  中文名:6-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit                 6-Benzyloxyindole  中文名:6-苄氧基吲哚  分子式:C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒     6-Aminoquinoxaline  中文名:6-氨基喹喔啉  分子式:C8H7N3  度:98.0%

注意事项;

1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 

 

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