人肾小球组织提取物培养

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人肾小球组织提取物【Human Kidney : Normal Glomerular Derivatives】

肾小球（glomerulus）为血液过滤器，肾小球毛细血管壁构成过滤膜。公司科技提供来自新鲜或冷冻人肾小球组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

细胞培养方法；

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项；

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

Tetramethylrhodamine-maleimide *Single isomer*5mg2',3'-Di-O-acetyl'-deoxy-fluorocytidine1615996

Tetramethylrhodamine-maleimide *Single isomer*5mgCapecitabine15436卡培他滨

EDANS C2 maleimide25mg4-(N-Methyl)-aminoantipyrine5198

DNP maleimide25mgValsartan methyl ester1378637

mBBr25mgα-D-Glucose4922α-D-葡萄糖
ER-878898  中文名：  分子式：C20H18F2O8S  度：98.0%  小鼠5羟色胺elisa试剂盒   小鼠5羟色胺试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠5羟色胺试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠5羟色胺试剂盒、小鼠5羟色胺eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

2,2-Diphenylglycine  中文名：  分子式：C14H13NO2  度：98.0%  小鼠5核苷酸酶elisa试剂盒   小鼠5核苷酸酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠5核苷酸酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠5核苷酸酶试剂盒、小鼠5核苷酸酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Phenytoin  中文名：苯妥英  分子式：C15H12N2O2  度：98.0%  小鼠25羟基维生素elisa试剂盒   小鼠25羟基维生素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠25羟基维生素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠25羟基维生素试剂盒、小鼠25羟基维生素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽elisa试剂盒   小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒、小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Nandrolone  中文名：诺龙  分子式：C18H26O2  度：98.0%  小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA试剂盒
肉桂油  Cinnamon oil  质量规格：工业级 活体细胞半胱氨酸蛋白酶13(CASPASE-13)活性原位荧光染色检测试剂盒20

柠檬醛(>95%,Pract Grade)  Citral  质量规格：>95%,Pract Grade 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-2(CASPASE-2)活性原位荧光染色检测试剂盒20

柠嗪酸(>98%,BR)  Citrazinic acid  质量规格：>98%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性原位荧光染色检测试剂盒20

草酸钴(>99%,BR)  Cobalt (II) oxalate  质量规格：>99%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-4(CASPASE-4)活性原位荧光染色检测试剂盒20

刀豆素A(> 95%,BR)  Concanamycin A  质量规格：> 95%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试剂盒20

化亚铜(>98%,BR)  Copper(I) bromide  质量规格：>98%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-6(CASPASE-6)活性原位荧光染色检测试剂盒20

无水乙酸铜(>99%,BR)  Copper(II) acetate  质量规格：>99%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性原位荧光染色检测试剂盒20

化铜(>99%,BR)  Copper(II) bromide  质量规格：>99%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性原位荧光染色检测试剂盒20

柠檬酸铜(>98.5%,BR)  Copper(II) , hydrate  质量规格：>98.5%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-9(CASPASE-9)活性原位荧光染色检测试剂盒20

氢氧化铜(>96.5%,Tech Grade)  Copper(II) hydroxide  质量规格：>96.5%,工业级 活体细胞脘蛋白去糖基化试剂盒20
人肾小球组织提取物培养兔球蛋白M(rabbit IgM)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzoyloxy-2-azetidinone  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮杂环丁酮  分子式：C10H9NO3  度：98.0%

兔球蛋白G(rabbit IgG)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzyl L-aspartate  2177-63-1  中文名：L-天冬氨酸-4-苄酯  分子式：C11H13NO4 

兔球蛋白E(rabbit IgE)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     4-Benzoyloxy-2-azetidinone  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮杂环丁酮  分子式：C10H9NO3 

兔细胞功能相关抗原3elisa试剂盒   兔细胞功能相关抗原3试剂盒   规格型号：96T/48T   兔细胞功能相关抗原3试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔细胞功能相关抗原3试剂盒、兔细胞功能相关抗原3 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：5-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%

兔细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit                 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：6-氨基-4-羟基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S

注意事项；

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。