大鼠前列腺组织提取物培养

大鼠前列腺组织提取物【Prostate: Normal Rat Prostate Derivatives】

前列腺是雄性*的性腺器官，位于膀胱与原膈之间。前列腺是不成对的实质性器宫，由腺组织和肌组织构成。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠前列腺组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

6×TriColor DNA loading buffer(三染料)×1ml3,5-Cycloergosta,8(14),22-triene243521

6-苄氨基嘌呤溶液（6-BA）5×1ml3',5'-Anhydrothymidine7483',5'-脱水胸苷

Acrylamide/Bis 19:1 %PAA Solution0ml3,4-O-Isopropylidene shikimic acid18753

Acrylamide/Bis 29:1 %PAA Solution0ml/0m3,4-Dihydro,4-dihydroxynaphthalen(2H)-one128912

AEBSF ×3,4-Didehydrosapriparaquione1427637
Cerebroside B  88642-46-0  中文名：脑苷酯B  分子式：C41H77NO9    前列腺素E1(PGE1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5    Human adenovirus IgG (ADV-IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA试剂盒

Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Epirengynic acid  1310146-00-9  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanDihydrotestosterone,DHTELISA试剂盒人双氢睾同(DHT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4    组织NADPH细胞色素C还原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量检测试剂盒20次
吗替麦考酚酯-d4  Mycophenolate Mofetil-d4  质量规格：美国进口 英文名称HumanPlateletFactor4ELISAKit人血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲基麦考酚酯(环氧树脂杂质E)  Methyl Mycophenolate (EP Impurity E)  质量规格：美国进口 英文名称HumanPPAR-γELISAKit人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)规格：96T/48T

吗替甲基麦考酚酯N-氧基(环氧树脂杂质G)  Mycophenolate Mofetil N-Oxide (EP Impurity G)  质量规格：美国进口 英文名称Humanpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit人相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

奈替米星  Netilmicin  质量规格：美国进口 英文名称HumanPro-ANP(1-98)ELISAKit人心肽Pro-ANP(1-98)规格：96T/48T

制霉菌素  Nystatin  质量规格：美国进口 英文名称HumanProgesteroneELISAkit人孕激素(Progesterone)规格：96T/48T

奥氮平内酰胺杂质  Olanzapine Lactam Impurity  质量规格：美国进口 英文名称HumanProinsulinELISAKit人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

奥氮平硫代内酰胺杂质  Olanzapine Thiolactam Impurity  质量规格：美国进口 英文名称HumanPSAELISAKit人前列腺特异性抗原(PSA)规格：96T/48T

2-羟甲基奥氮平  2-Hydroxymethyl Olanzapine  质量规格：美国进口 英文名称HumanP-SelectinELISAkit人P-Selectin规格：96T/48T

N-去甲基奥氮平  N-Demethyl Olanzapine  质量规格：美国进口 英文名称humanPTHELISAKIT人甲状旁腺激素(PTH)规格：96T/48T

N-氧基奥氮平  Olanzapine N-Oxide  质量规格：美国进口 英文名称HumanS100BELISAKit人S100B规格：96T/48T
大鼠前列腺组织提取物培养无内质粒小量提取试剂盒   50T  Androstenedione  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2  度：98.0%

无内质粒大量提取试剂盒   5T  Androstenone hydrazone  63015-10-1  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O  度：98.0%   

无菌甘油   100ml  Androstenedione  1963/5/8  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2  度：98.0%  关键词： 

胃泌素 (Gasin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4 

胃泌素   英文名称：   Gasin   规格：   48T/96T   英文缩写：   G  Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3  度：98.0%  关键词：