大鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物培养

大鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物【Rat Lung: Normal Artery Smooth Muscle Cell Derivatives】

大鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物是从大鼠肺大动脉平滑肌细胞提取的，大鼠肺大动脉平滑肌细胞从正常大鼠肺大动脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

霍乱弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TThianaphthene955苯并噻吩

河弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TThiamphenicol153185甲砜霉素

拟态弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TThevetin B271279

艰难梭菌实时荧光PCR检测试剂盒TThevebioside1145867

艰难梭菌tcdA基因实时荧光PCR检测试剂盒TTetrahydrolachnophyllum lactone5677
HumanDopamineD1receptor,D1RELISA试剂盒人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  中文名：  分子式：C9H16O3 

humandopamine,DAELISA试剂盒人多巴胺(DA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene  中文名：1,4-双(2-苯并恶唑基)萘  分子式：C24H14N2O2 

Humandopachrometaomerase,DTELISA试剂盒人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒规格：96T/48T  11,12-Di-O-acetyltenacigenin B  857897-01-9  中文名：  分子式：C25H36O7 

HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA试剂盒人D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒规格：96T/48T  11-Hydroxyjasmonic acid  中文名：  分子式：C12H18O4 

HumanDiphtheriaaibodyELISA试剂盒人白喉抗体(DiphtheriaAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T  11α-Hydroxycanrenone  192569-17-8  中文名：  分子式：C22H28O4
妥布霉素A  Tobramycin A  质量规格：美国进口 英文名称MouseGlp-1ElisaKit小鼠胰高糖素肽(Glp-1)规格：96T/48T

生物素基妥布霉素酰胺  Biotinyl Tobramycin Amide  质量规格：美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseBBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GPBB)规格：96T/48T

妥布霉素硫酸盐  Tobramycin sulphate  质量规格：美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseIIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)规格：96T/48T

氘化妥布霉素  Tobramycin Deuterated  质量规格：美国进口 英文名称MouseGlycogenphosphorylaseMMELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格：96T/48T

盐酸拓扑替康标记 d6  Topotecan Hydrochloride Labeled d6  质量规格：美国进口 英文名称MouseGlycoprotein96ELISAKit小鼠肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)规格：96T/48T

N-去甲基拓扑替康  N-Desmethyl Topotecan  质量规格：美国进口 英文名称Mousegp130solublefragmeELISAKIT小鼠gp130规格：96T/48T

拓扑替康羧酸钠盐  Topotecan Carboxylic Acid  Salt  质量规格：美国进口 英文名称MouseHAELISAKit小鼠透明质酸(HA)规格：96T/48T

拓扑替康  Topotecan  质量规格：美国进口 英文名称MouseHbA1cELISAKit小鼠糖化血红蛋白(HbA1c)规格：96T/48T

15-酮基氟前列醇异丙酯  15-keto Fluprostenol isopropyl ester  质量规格：美国进口 英文名称MouseHCYELISAKit小鼠同型半胱氨(HCY)规格：96T/48T

曲唑酮盐酸盐-d6  Trazodone-d6 Hydrochloride  质量规格：美国进口 英文名称Mousehemeoxygenase-1ELISAKit小鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格：96T/48T
大鼠肺大动脉平滑肌细胞提取物培养人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISAKit                 Thiamphenicol  15318-45-3  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人生长激素受体(GHR)酶联吸附测定试剂盒   Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit                  3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名：异绿原酸A  分子式：C25H24O12 

人三0酸鸟苷环水解酶1   英文名称：   Human Guanosine 5′-iphosphate Cyclohydrolase 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   GCH1  3-O-Acetylandrostenone hydrazone  中文名：3-O-乙酰基雄酮腙  分子式：C21H32N2O2 

人乳酸脱氢酶   英文名称：   Human Lactate Dehydrogenase   规格：   48T/96T   英文缩写：   LDH  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  36157-40-1  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS 

人溶菌酶   英文名称：   lysozyme   规格：   48T/96T   英文缩写：   LZM/LYS  3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  中文名：  分子式：C17H16ClIO2  度：98.0%

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。