人肾小管组织提取物培养

人肾小管组织提取物【Human Kidney: Normal Kidney Tubular Tissue Derivatives】

肾小管与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管，具有重吸收和排泌作用.肾小管按不同的形态结构，分布位置和功能分成三部分；近端小管，细段和远端小管。肾小管在肾髓质中。公司科技提供来自新鲜或冷冻人肾小管组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法；
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项；

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项；

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

Vivaspin 0超滤管个/包 1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene73481,8-双二甲氨基萘

Vivaspin 6超滤管5个/包 Bis(4-bromophenyl)amine162927双(4-溴苯基)胺

WB用孵育盒4,4'-Bis(N-carbazolyl),1'-biphenyl5832814,4'-二(9-咔唑)

Western Blot转膜滚轴CTU Guanamine2253

X光暗匣5×7inchBis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone2753双[4-(2-羟乙氧基)苯基]砜
Erythritol  中文名：赤藓糖醇  分子式：C4H10O4  度：%  兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISAKit  

Perforatumone  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%  兔子睾(T)ELISAKit  

3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名：异绿原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%  兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISAKit              

Panaxyne  中文名：  分子式：C14H20O2  度：97.0%  兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISAKit  

Senkyunolide H  中文名：  分子式：C12H16O4  度：96.0%  兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISAKit
三环唑标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  质量规格：10μg/ml,u=2% 人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA检测试剂盒Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISAKit 96T/48T

氟乐灵标准溶液(100μg/ml,u=3%)  Trifluralin solution  质量规格：100μg/ml,u=3% 人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)试剂盒 Human α-SMA ELISA Kit

草达津(标准品)  Trietazine  质量规格：分析标准品 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA检测试剂盒Humanα-GlucosidaseELISAKit 96T/48T

阿克泰(分析标准品,98%)  Thiamethoxam  质量规格：分析标准品,98% 人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)试剂盒 Human α-glucosidase ELISA Kit

三唑酮(分析标准品，99.8%)  Triadimefon  质量规格：分析标准品，99.8% 人α羟基脱氢酶(αHBDH)ELISA检测试剂盒Humanα-HydroxybyrateDehydrogenase,αHBDHELISAKit 96T/48T

无水硫酸钠(分析标准品,pestizides≤1 ppm)   sulfate anhydrous  质量规格：分析标准品,pestizides≤1 ppm 人α乳清蛋白(α-La)ELISA检测试剂盒HumanαLactalbumin,α-LaELISAKit 96T/48T

甲嘧磺隆(标准品)  Sulfometuron-methyl  质量规格：分析标准品 人α乳清蛋白(α-La)试剂盒 Human α-La ELISA Kit

西草净(分析标准品,97%)  Simetryne  质量规格：分析标准品,97% 人α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)试剂盒 Human α-ketoglarate dehy-drogenase,α-KGDHC ELISA Kit

喹禾灵(分析标准品,96%)  Quizalofop-ethyl  质量规格：分析标准品,96% 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA检测试剂盒Humanα-Synuclein,α-SYNELISAKit 96T/48T

精喹禾灵(分析标准品，98%)  Quizalofop-p-ethyl  质量规格：分析标准品，98% 人α-烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)试剂盒 Human ENO1 ELISA kit
人肾小管组织提取物培养兔抗脑组织抗体elisa试剂盒   兔抗脑组织抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔抗脑组织抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔抗脑组织抗体试剂盒、兔抗脑组织抗体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  中文名：  分子式：C19H18N2O3S 

兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISAKit     5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  231278-84-5  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3  度：98.0%  关键词： 

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒     5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione  144809-28-9  中文名：  分子式：C19H18N2O3S 

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit     5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3  度：98.0%

兔巨噬细胞炎症蛋白-5(rabbit MIP-5)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羟甲基糠醛  分子式：C6H6O3