人子宫颈组织提取物 说明书

人子宫颈组织提取物 【Human Cervix : Normal Cervical Derivatives】

子宫颈是女性系统中重要组织器官之一，从胚胎和女性胎儿起直至老妪，子宫颈涉及女性一生中的妇科、产科、计划生育、妇女保健健康等疾病防治和保健问题。公司科技提供来自新鲜或冷冻人子宫颈组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法；
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项；

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项；

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

Wright Stain 瑞氏色素   5g7-Amino-methylcoumarin29317-氨基-甲基香豆素

X-gal   0mg/1g Indometacin536吲哚美辛

X-gluc   mg/Dexamethasone 21-phosphate di salt23929地塞米松磷酸钠

Xylan木聚糖   5g Folic acid5叶酸

Xylene Cyanole FF 二甲苯菁   1gAmprolium hydrochloride1378盐酸氨丙林
Esomeprazole   161796-78-7  中文名：埃索美拉唑钠  分子式：C17H19N3NaO3S  度：98.0%  关键词：    小鼠神经酸酶   英文名称：   Mouse Neidase   规格：   48T/96T   英文缩写：   NEU

Escitalopram oxalate  219861-08-2  中文名：草酸西酞普兰  分子式：C22H23FN2O5  度：99.0%      小鼠8羟基脱氧鸟苷   英文名称：   Mouse 8-hydroxy-2'-desoxyguanosine   规格：   48T/96T   英文缩写：   8-OHDG

Erythritol  149-32-6  中文名：赤藓糖醇  分子式：C4H10O4  度：%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠嗅素4   英文名称：   Mouse Olfactomedin 4   规格：   48T/96T   英文缩写：   OLFM4

Erlotinib hydrochloride  183319-69-9  中文名：盐酸埃罗替尼  分子式：C22H24ClN3O4  度：98.0%      小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒  

Erlotinib  183321-74-6  中文名：埃罗替尼  分子式：C22H23N3O4  度：98.0%  关键词：    小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒
三亚苯(>96.0%(GC))  Triphenylene  质量规格：>96.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

内消旋-四苯基卟吩(>92.0%(HPLC))  meso-Tetraphenylchlorin  质量规格：>92.0%(HPLC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA检测试剂盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKIT 96T/48T

四苯基卟吩(不含氯)(>98.0%(HPLC))  Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)  质量规格：>98.0%(HPLC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP2 ELISA Kit

2,4,6-三苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))  2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP-2 ELISA Kit

1,3-二苯基-1,3-丙二酮(>98.0%(GC))  1,3-Diphenyl-1,3-propanedione  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA检测试剂盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKIT 96T/48T

2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))  2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione  质量规格：>97.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP3 ELISA Kit

9H,9H-三十氟-8,10-十七烷二酮(>98.0%(GC))  9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP-3 ELISA Kit

9-菲(>98.0%(GC))  9-Bromophenanthrene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

3-菲(>98.0%(GC))  3-Bromophenanthrene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA检测试剂盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 96T/48T

3,6-二甲基菲(>95.0%(GC))  3,6-Dimethylphenanthrene  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒 ，英文名： IGFBP4 ELISA Kit
人子宫颈组织提取物 说明书兔碱性成纤维细胞生长因子   英文名称：   Rabbit Basic Fibroldast Growth Factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   BFGF  4β-Hydroxywithanolide E  54334-04-2  中文名：4β-羟基醉茄内酯E  分子式：C28H38O8  度：98.0%  关键词：  蜕皮甾体拮抗剂; 抗肿瘤; 酸浆属; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔碱性成纤维生长因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C18H27N3O4 

兔碱性0酸酶(ALP)ELISA试剂盒     5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3  度：98.0%

兔基质细胞衍化生长因子1a   英文名称：   Rabbit Somal cell Derived Factor 1a   规格：   48T/96T   英文缩写：   SDF1a  4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS  度：98.0%

兔基质金属蛋白酶-9(rabbit MMP-9)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18