小鼠内脏脂肪细胞提取物

小鼠内脏脂肪细胞提取物【Mouse Fat: Normal Visceral Fat Cells Derivatives】

小鼠内脏脂肪细胞提取物是从小鼠原代内脏脂肪细胞提取的，小鼠原代内脏脂肪细胞从正常小鼠脂肪组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

胶原酶I   0mg3-Ethoxyandrosta,5-dien7-one97263-乙氧基-雄甾,5-二烯7-酮

胶原酶II   0mg9-Dehydroandrostenedione3599-去氢雄烯二酮

胶原酶IV   0mg5-Androstenβ-ol7-one ethyleneketal774

胶原酶V   0mg3-Amino-phenylpyrazole1573-氨基-苯基吡唑

焦磷酸钠   0g3-Amino-phenyl-propa459343-氨基-苯基-丙醇
humanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  18531-94-7  中文名：(R)-(+)-1,1'-联-2-萘酚  分子式：C20H14O2 

Humanparaoxonase,PONELISAKit人酶(PON)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (1S,2S)-1-Amino-2-Indanol  中文名：(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO 

HumanparamyxovirusparotitisIgMELISAKit人腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒规格：96T/48T  (1S,2R)-2-Ami,2-diphenylethanol  23364-44-5  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO 

HumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺炎病毒IgGELISA试剂盒规格：96T/48T  (1S)-4,5-Dimethoxy-1-[(methylamino)methyl]benzocyclobutane hydrochloride  中文名：  分子式：C12H18ClNO2 

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit人对(PABA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (1R,2S)-2-Ami,2-diphenylethanol  23190-16-1  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO
无水二氢钠（标准品）   Dihydrogen Phosphate Anhydrous  质量规格：供检查用 小鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒 ，英文名： SDH ELISA Kit

长春西汀（标准品）  Vinpocetine  质量规格：含量测定 小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 ，英文名： ENA-78/CXCL5 ELISA Kit

枸橼酸铋雷尼替丁（标准品）  Ranitidine bismuth   质量规格：供检查用 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体(OMgp-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： OMgp-Ab ELISA Kit

丹曲林钠（标准品）  Dantrolene  hemiheptahydrate  质量规格：含量测定 小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T

呱西替柳（标准品）  Guacetisal  质量规格：含量测定 小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒 ，英文名： GFAP ELISA Kit

盐酸黄酮哌酯（标准品）  Flavoxate hydrochloride  质量规格：含量测定 小鼠神经趋化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒 ，英文名： fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit

3-甲基黄酮-8-羧酸（标准品）  3-Methylflavone-8-carboxylic acid  质量规格：供检查用 小鼠神经生长导向因子Slit2ELISA检测试剂盒MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 96T/48T

盐酸番茄碱（标准品）  Tomatidine hydrochloride  质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒MouseNervegrowthfactor,NGFELISAkit 96T/48T

盐酸头孢唑兰  Cefozopran hydrochloride  质量规格：>97%,BR 小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 ，英文名： NGF ELISA Kit

阿嗪米特（标准品）  Azintamide  质量规格：含量测定 小鼠神经生长因子前体(proNGF)ELISA试剂盒 ，英文名： proNGF ELISA Kit
小鼠内脏脂肪细胞提取物人P27蛋白elisa试剂盒   人P27蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人P27蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人P27蛋白试剂盒、人P27蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Schleicheol 1  256445-66-6  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  关键词：  抗癌; 久树; 豆甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

人H-rasELISAKit                 3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8 

人HA丝酸肽酶1(HA1)酶联吸附测定试剂盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit                  3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  中文名：  分子式：C10H10O3 

人Dickkopf1elisa试剂盒   人Dickkopf 1试剂盒   规格型号：96T/48T   人Dickkopf 1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人Dickkopf 1试剂盒、人Dickkopf 1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3  度：98.0%  关键词： 

人chemerinelisa试剂盒   人chemerin试剂盒   规格型号：96T/48T   人chemerin试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人chemerin试剂盒、人chemerin elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Triethyl   77-93-0  中文名：柠檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7  度：98.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库