人成骨细胞说明书

人成骨细胞【Human Bone: Normal Osteoblasts】
      产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

phospho-AKT1(Thr34) 磷酸化蛋白激酶B抗体  棉花立枯菌
phospho-ATF2(Ser472) 磷酸化活化复制因子2抗体  白色假丝酵母
3-Apr 凋亡相关蛋白3抗体 
ATG18 自噬相关蛋白18抗体  阪崎肠杆菌
ATG4A 自噬相关蛋白4A抗体  清酒乳杆菌清酒亚种
APOA4 载脂蛋白A4抗体  大豆慢生根瘤菌
ALOX12 12脂氧合酶抗体  树状微杆菌
Angiotensin III 血管紧张素III抗体  蛾微杆菌
ADCY3 腺苷酸环化酶3抗体  青春双歧杆菌
Angiomotin 血管动蛋白抗体  串珠镰孢
Adenovirus 5 E1A 腺病毒早期E1A蛋白抗体  玖红穗状霉
phospho-ATF2 (Ser44) 磷酸化活化复制因子2抗体  构巢裸胞壳
phospho-ATF2 (Ser94) 磷酸化活化复制因子2抗体  杂色曲霉
phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失调症蛋白1抗体  亚麻刺盘孢
ANKRD17 锚蛋白重复结构域蛋白17抗体  休哈塔假丝酵母
ALDH1A1 胞质乙醛脱氢酶1抗体  鲁氏接合酵母
ARL3 ADP核糖基化样因子ARL3抗体  莫格球拟酵母
15 Lipoxygenase 1 花生四烯酸15脂氧合酶1抗体  放射性根瘤菌
ABC2 癌增强蛋白2抗体  褐球固氮菌
Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗体  假结核耶尔森氏菌
Alpha B Crystallin α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体  小肠结肠炎耶尔森氏菌
ADORA2B 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体  酪丁酸梭菌
ARK5 AMPK的相关蛋白激酶5抗体  白色葡萄球菌

小鼠CXC趋化因子配体16(mouse CXCL16) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠CXCL1/KC(mouse KC) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠环磷酸鸟苷(mouse cGMP) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠睫状神经营养因子(mouse CNTF) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠sCD40配体(mouse sCD40 Ligand) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠CD34(mouse CD34) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mouse sCD40L) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠补体C3a(mouse C3a) ELISA 48T/96T 进口分装
人成骨细胞说明书小鼠补体C5a(mouse C5a) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠血清总补体(mouse CH50) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠肌酸激酶(mouse CK) ELISA 48T/96T 进口分装
小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB) ELISA 48T/96T 进口分装