小鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书

小鼠脑静脉血管内皮细胞提取物【Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Endothelial CellsDerivatives】

小鼠脑静脉血管内皮细胞提取物是从小鼠原代脑静脉血管内皮细胞提取的，小鼠原代脑静脉血管内皮细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

糠秕马拉色菌 KB1mlAfatinib812阿法替尼

厚皮马拉色菌 HP1mlAdynerigenin β-neritrioside887219

根癌农杆菌EHA51mlAdrenosterone3825肾上腺甾酮

谷氨酸棒状杆菌ATCC1321mlAdipic dihydrazide713己二酸二酰肼

白色念珠菌ATCC2311mlAdenosine 5'-monophosphate6195'-腺嘌呤核苷酸
Humanplatelet-associatedCompleme3,PAC3ELISAKit人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (+)-Noe's reagent  87248-50-8  中文名：(+)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3 

HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Testosterone  1965/6/5  中文名：1-睾酮  分子式：C19H28O2 

HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Naphthol  中文名：  分子式：C10H8O 

Humanplateletactivatingfactor，PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Monopalmitin  542-44-9  中文名：1-棕榈酸单甘油酯  分子式：C19H38O4 

Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Indanone  83-33-0  中文名：  分子式：C9H8O
硒吩(>98.0%(GC))  Selenophene  质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒 ，英文名： IDE ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]  质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒 ，英文名： ISR ELISA Kit

1,3,6,8-四芘(>98.0%(T))  1,3,6,8-Tetrabromopyrene  质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒 ，英文名： ISR-β ELISA Kit

2,2',7,7'-四-9,9-联亚芴基(>98.0%(HPLC))  2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene  质量规格：>98.0%(HPLC) 小鼠胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒 ，英文名： IRS1 ELISA Kit

酞菁铜(II)(α-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (α-form)  质量规格：>90.0%(T) 小鼠胰岛素受体底物2(IRS2)ELISA试剂盒 ，英文名： IRS2 ELISA Kit

酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalocyanine (β-form)  质量规格：>90.0%(T) 小鼠胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T))  Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)  质量规格：>95.0%(T) 小鼠胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL5 ELISA Kit

3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(HPLC)(T))  3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠胰岛素样蛋白6(INSL6)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL6 ELISA Kit

 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(T))  3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin  质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC))  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)  质量规格：>96.0%(HPLC) 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
小鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书尿激酶型纤溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-苄基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%   

尿蛋白定性测试盒   Acid esterase stain                 3-Quinuclidinone  中文名：3-奎宁环酮  分子式：C7H11NO 

内脂素/内脏脂肪素   英文名称：   Visfatin   规格：   48T/96T   英文缩写：   Visfatin  Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18 

内脂素 / 内脏脂肪素 (Visfatin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Ondansetron  中文名：昂丹司琼  分子式：C18H19N3O 

内源性糖皮质激素   英文名称：   Human Glucocoicoid Endogenous   规格：   48T/96T   英文缩写：   GC  Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2