小鼠视网膜组织提取物说明书

小鼠视网膜组织提取物【Eye: Normal Mouse Retinal Pigment Derivatives】

视网膜组织居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠视网膜组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

DEPC   ml/ml/0ml1-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433

D-Fructose D-果糖   0g 1-Methyl-nitrophthalate2164

D-Glucose D-葡萄糖   0g 1-Indanone833

DIECA 茉莉酸合成途径抑制剂   5g 1-Indanamine hydrochloride324573

Digitonin 洋地黄皂苷   0mg 1-Hydroxy-methylanthraquinone6268/9/31-羟基-甲基蒽醌
Cynanoside F  1800029-50-8  中文名：  分子式：C41H62O15    组织PHKG2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Periplocoside F  119902-17-9  中文名：  分子式：C63H104O23    HumanPeptideYYELISAKit人多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒规格：96T/48T

7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名：  分子式：C29H46O3    可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Minisecolide C  1967030-77-8  中文名：  分子式：C28H34O7    Human aial naiuretic peptide (ANP) ELISA Kit 人心肽(ANP)ELISA试剂盒

Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6    Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit 人PL12抗体/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
尿嘧啶（标准品）  Uracil   质量规格：HPLC法含量测定 小鼠尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)ELISA试剂盒 ，英文名： NNMT ELISA Kit

尿嘧啶（标准品）  Uracil   质量规格：含量测定 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1()ELISA试剂盒 ，英文名： ELISA Kit

丙胺肽林（标准品）  Propantheline bromide  质量规格：HPLC法含量测定 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)ELISA试剂盒 ，英文名： NOX4 ELISA Kit

盐酸妥洛特罗（标准品）  Tulobuterol hydrochloride  质量规格：HPLC法含量测定 小鼠黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA试剂盒 ，英文名： MAdCAM1 ELISA Kit

无水氢二钠（标准品）  N-(Isoxazol-5-yl)sulphanilamide  质量规格：含量测定 小鼠鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)ELISA试剂盒 ，英文名： GUCA2A ELISA Kit

盐酸拉贝洛尔（标准品）  Labetalol hydrochloride  质量规格：含量测定 小鼠鸟酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒 ，英文名： ODC ELISA Kit

水杨酰胺（标准品）  Salicylamide  质量规格：HPLC法含量测定 小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

非普拉宗（标准品）  Feprazone  质量规格：UV法溶出度检查 小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA检测试剂盒Mouseurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T

茴三硫;胆维他  Anethole trithione  质量规格：>99%,BR 小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒 ，英文名： uPA ELISA Kit

茴三硫（标准品）  Anethole trithione  质量规格：含量测定 小鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA检测试剂盒MouseUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 96T/48T
小鼠视网膜组织提取物说明书血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒              Adefovir dipivoxil  中文名：阿德福韦酯  分子式：C20H32N5O8P 

血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISAKit     4-Aminosalicylic acid  65-49-6  中文名：4-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3 

血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  1-Methyl-5-amiH-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C14H19N3O2  度：98.0%

血小板衍生生长因子elisa试剂盒   血小板衍生生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   血小板衍生生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：血小板衍生生长因子试剂盒、血小板衍生生长因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Adefovir  中文名：阿德福韦  分子式：C8H12N5O4P  度：98.0%

血小板衍生生长因子(PDGF)ELISAKit     Acyclovir  中文名：阿昔洛韦  分子式：5O3  度：99.0%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。