小鼠表皮角质形成细胞提取物说明书

小鼠表皮角质形成细胞提取物【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】

小鼠表皮角质形成细胞提取物是从小鼠原代表皮角质形成细胞提取的，小鼠原代表皮角质形成细胞从正常小鼠皮肤组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

口蹄疫3ABC病毒抗体ELISA检测试剂盒96T*2Ethyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

猪乙脑病毒抗体ELISA检测试剂盒96T*2Ethyl chlorogenate42582绿原酸乙酯

猪弓形虫病毒抗体ELISA检测试剂盒96T*2Ethyl 5-amino-cyano-(2-ethoxy-oxoethyl)thiophene-carboxylate5816

猪细小病毒抗体ELISA检测试剂盒96T*2Ethyl 3-cyclopropyl-oxopropanoate249222

猪圆环病毒Ⅱ型抗体检测试纸条卡/包，包/盒Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate145143,5-二咖啡酰奎宁酸乙酯
Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羟孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Methylprednisolone hemisuccinate  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Methylprednisolone acetate  中文名：甲基泼尼松龙醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  小鼠6--前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  中文名：  分子式：C22H30O4  度：98.0%  小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Methylprednisolone  中文名：甲基泼尼松龙  分子式：C22H30O5  度：98.0%  小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
腺苷激酶抑制剂  Adenosine Kinase Inhibitor  质量规格：美国进口 英文名称HumanFibronectinELISAKit人纤维连接蛋白(FN)规格：96T/48T

2-氨基腺苷  2-Amino Adenosine  质量规格：美国进口 英文名称HumanFIIELISAKit人凝血因子II(FII)ELISAKit规格：96T/48T

5'-乙基酰胺基-2',3'-亚异丙基腺苷  5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine  质量规格：美国进口 英文名称HumanFIXELISAKit人凝血因子IX(FIX)规格：96T/48T

别嘌醇核苷  Allopurinol riboside  质量规格：美国进口 英文名称HumanFIXELISAKit人凝血因子IX规格：96T/48T

N-乙酰两性霉素B  N-Acetyl Amphotericin B  质量规格：美国进口 英文名称HumanFlt-3ELISAKit人Flt-3规格：96T/48T

血管紧张素 片段1-7醋酸盐水合物  Angiotensin Fragment 1-7 acetate salt hydrate  质量规格：美国进口 英文名称HumanFLT3ELISAKIT人FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)规格：96T/48T

[Val5]-血管紧张素 II 醋酸盐水合物  [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate   质量规格：美国进口 英文名称HumanFlt-3ligandELISAKit人Flt-3配体(Flt-3ligand)规格：96T/48T

阿替洛尔酸  Metoprolol Acid  质量规格：美国进口 英文名称HumanFollistatinELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(R)-(+)-阿替洛尔  (R)-(+)-Atenolol  质量规格：美国进口 英文名称HumanFractalkineELISAKit人Fractalkine规格：96T/48T

S-(-)-阿替洛尔  S-(-)-Atenolol  质量规格：美国进口 英文名称HumanFree-T3ELISAKit游离*状腺原氨酸(Free-T3)规格：96T/48T
小鼠表皮角质形成细胞提取物说明书绵羊球蛋白A   英文名称：   Immunoglobulin A   规格：   48T/96T   英文缩写：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

绵羊促卵泡生成激素   英文名称：   Follicle Stimulating Hormone   规格：   48T/96T   英文缩写：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

绵羊白介素2(IL-2)ELISAKit                 Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒   规格型号：96T/48T   绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒、绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

绵羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit     Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。