小鼠小梁网细胞提取物培养

小鼠小梁网细胞提取物【Mouse Eye：Normal Trabecular Meshwork Cells Derivatives】

小鼠小梁网细胞提取物是从小鼠原代小梁网细胞提取的，小鼠原代小梁网细胞从正常小鼠眼组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

克伦特罗 ELISA试剂盒96TN-(2-Methoxyphenyl)acetamide9362-乙酰

孔雀石绿 ELISA试剂盒96TN-(2-Hydroxyethyl)-(4-nitrophenyl)propylamine16349

泰乐菌素 ELISA试剂盒96TN-(2,6-Diphenylmethyl)-piperazine acetylamine52941

硝基咪唑 ELISA试剂盒96TN-(2,6-Dimethylphenyl)-piperidinecarboxamide2726

新霉素 ELISA试剂盒96TN-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide1615967
Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  112811-71-9  中文名：  分子式：C16H15F2NO4  度：98.0%  关键词： 

Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  中文名：  分子式：C9H16O3  度：98.0%

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  66900-93-4  中文名：  分子式：C9H16O6  度：98.5%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 人可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  1-Amino-2-methylanthraquinone  中文名：1-氨基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H11NO2  度：98.0%

Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  (+)-Noe's reagent  中文名：(+)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3  度：98.0%
腺苷-5’-二一钠  ADP.Na  质量规格：>98%,BR 小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit

D-纤维二糖  D-(+)-Cellobiose  质量规格：>98%,BR 小鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 ，英文名： Aβ1-40 ELISA Kit

胞苷-5'-二二钠盐(CDP.Na2)  Cytidine-5'-diphosphate di salt  质量规格：>98%,BR 小鼠淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒 ，英文名： Aβ1-42 ELISA Kit

胞苷-5'-单二钠盐(CMP.Na2)  Cytidine-5'-monophosphate Di Salt  质量规格：>98%,BR 小鼠淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1)ELISA试剂盒 ，英文名： APLP1 ELISA Kit

TFA-aa-U  TFA-aa-U  质量规格：>98%,BR 小鼠淀粉样前体蛋白(APP)ELISA试剂盒 ，英文名： APP ELISA Kit

TFA-aa-dU  TFA-aa-dU  质量规格：>98%,BR 小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA试剂盒 ，英文名： APAF1 ELISA Kit

5-尿苷  5-Iodo-Uridine  质量规格：>99%,BR 小鼠凋亡相关因子(FAS)ELISA试剂盒 ，英文名： FAS ELISA Kit

5--2'-脱氧尿苷(苷)  5-Iodo-deoxyuridine  质量规格：>98%,BR 小鼠凋亡相关因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA试剂盒 ，英文名： Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit

5--2'-脱氧胞苷  5-Iodo-deoxycytidine  质量规格：>98%,BR 小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2'-甲氧基尿苷  2’-OMe Uridine  质量规格：>98%,BR 小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA检测试剂盒MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T
小鼠小梁网细胞提取物培养内皮生长因子 165(VEGF165)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19 

内皮生长因子 (VEGF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Androstanolone 17-benzoate  中文名：雄诺龙苯甲酸酯  分子式：C26H34O3  度：98.0%

紧张素转化酶   英文名称：   Angiotensin Conveing Enzyme   规格：   48T/96T   英文缩写：   ACE  Otophylloside B  中文名：青阳参苷B  分子式：C49H78O16  度：97.0%

紧张素I(素、AngI)   96T/48T  Ornidazole  中文名：奥硝唑  分子式：C7H10ClN3O3  度：98.0%

紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   英文缩写：   AT1R   规格：   48T/96T  Ophiopogonin D  中文名：麦冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%