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上海一研生物科技有限公司
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犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明

犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明
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产品型号:
50T
产品报价:
产品特点:
犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测的试剂盒。
  50T犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明的详细资料:

产品名称英文名称货号
 犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明 Canine Parvo Virus(CPV)     EY-P6517  

实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性*,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量准确,重现性的定量方法,已得到*的*,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。

荧光定量PCR服务:
公司推出,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片,siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务,全部实验皆使用进口试剂完成,主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求:
(01)请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA(大于 5 ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于 5 ug/样品)。
(02)请提供已知的全长基因序列。
(03)请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
(01)引物(探针)设计与合成。
(02)提取DNA/RNA,样本逆转录成cDNA。
(03)进行Real Time PCR实验,进行实验结果分析。
(04)实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准:
  我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。

乙酸100毫升  rabbitadiponectin,ADPELISA试剂盒兔子脂联素(ADP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
107-66-4二正丁酯Dibutyl phosphate  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA试剂盒人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
三嶙酸脱氧核糖核苷酸50克RT  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1,3-丙二醇单 3-Ethoxy-1-propanol,97% 111-35-3 5G 通用试剂  人T细胞生长因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
基膦醋二酯 Dimqthyl mqthylphosphonctq 726-79-6  兔子VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)免疫试剂盒 Rabbit VGF nerve growth factor inducible,VGF ELISA kit
十四烷基基溴化50克  HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
(派洛宁B)  Humanglycogensyhasekinase,GSKELISA试剂盒人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
移液器P5000shēng huà shì jì容量:RT,避光100克  组织蛋白巯基/结合巯基含量比色法定量检测试剂盒20次
5-录水杨醋;5-录-2-羌基本加醋 5-Chlorosclicylic ccid;5-Chloro-2-xy7noxybqnzoic ccid 31-14-  Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸丫啶shēng huà shì jì容量:2~8℃250克  兔白细胞介素-35(IL-35)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
邻酚,英文名或英文缩写:o-Cresol,级别:CP,99%,规格:500克  Human1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA试剂盒人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒规格:96T/48T
84366-81-4黄素腺嘌呤二核苷酸(-20℃)Flavin adenine dinucleotide diwo7ium salt  Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISAKit人抗胰岛素受体抗体(AIRA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
6-羟基-5-[(2-甲氧基-5-甲基-4-磺本基)偶氮]2-奈磺酸二钠盐,英文名或英文缩写:Allura Red AC,级别:FMP,65%,规格:25克  人白细胞分化抗原30(CD30)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
二氢白屈菜红碱 Dihydrochelerythrine (HPLC,≥98%) 6880-91-7 5MG 通用试剂  兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫试剂盒 Rabbit iercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit
癸醋;羊蜡醋 Dqccnoic ccid;Dqcctoic ccid;Dqcylic ccid;Dqcoic ccid;Noncnq-α-ccrboxylic ccid 334-48-2  嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)ELISA试剂盒 ,英文名: CyPB ELISA Kit
二扶化镍,英文名或英文缩写:Nickel(II) fluoride tetrahydrate,级别:CP,47%,规格:25克  Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
592-41-61-己烯;丁基1-Hexene;Hexylene;Butyletxylene  Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISA试剂盒人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
TRISGLYCINE-SDS5XTG-SDS缓冲液,5X 浓缩液超纯级500MLRT  组织乙酰辅酶A胆固醇乙酰转移酶(ACAT)活性荧光定量检测试剂盒20次
2-脱氧-D-核糖 2-Dqoxy-D-ribosq 233-67-2  HumanGlathioneperoxidase,GSH-PxELISAKit人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HCTFVISUALIZATION500/CS可视固定系统, 含酒精组织学级3MLRT  人腺病毒(ADV)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

几种传统荧光定量PCR方法简介:

1)内参照法:
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
犬细小病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明2)竞争法:
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。

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