人脉络膜血管细胞提取物【Human Eyes: Normal Choroidal Vascular Cells Derivatives】 人脉络膜血管细胞提取物是从人原代脉络膜血管细胞提取的,人原代脉络膜血管细胞从正常人脉络膜血管组织制备。正常人脉络膜血管组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 英文名称 | 货号 | 人脉络膜血管细胞提取物培养 | Human Eyes: Normal Choroidal Vascular Cells Derivatives | EYX99073 |

我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。 细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
 实验事项: 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 注意事项: 1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 双面架(S,S),6-Bis(4-isopropyl-oxazolin-yl)pyridine1189491(S,S),6-双(4-异丙基-恶唑啉-基)吡啶 四色广泛pH试纸 1条/盒 N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide26515N-[双(甲硫基)亚甲基]对甲苯磺酰胺 塑料方形培养皿 ×cm 0套/箱4,4'-Bis(5-methyl-benzoxazolyl)stilbene2394,4'-双(5-甲基-苯并恶唑基)芪 塑料方形培养皿 13×13cm1套/箱 Bis(2,6-diisopropylphenyl)carbodiimide21624双(2,6-二异基)碳二亚胺 塑料下口瓶5L/L/L/LN,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide421378N,N-双(2-氯乙基)对甲苯磺酰胺 N-Acetyl-D-tryptophan 2280/1/5 中文名:N-乙酰基-D-色氨酸 分子式:C13H14N2O3 度:99.0% 关键词: 小鼠抗可提取核抗原抗体ENA抗体 英文名称: Mouse Exactable Nuclear Aibody 规格: 48T/96T 英文缩写: ENA N-Acetylcaprolactam 1888-91-1 中文名:N-乙酰己内酰胺 分子式:C8H13NO2 度:98.0% 关键词: 小鼠β内啡肽 英文名称: Beta-Endorphin 规格: 48T/96T 英文缩写: β-EP N-Acetyl-5-hydroxytryptamine 1210-83-9 中文名:N-乙酰基-5-羟基色胺 分子式:C12H14N2O2 度:99.0% 关键词: 小鼠表皮生长因子 英文名称: epidermal growth factor-like growth factor 规格: 48T/96T 英文缩写: EGF N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide 147200-03-1 中文名: 分子式:C10H14N2O5S3 度:98.0% 关键词: 小鼠细胞色素氧化酶(CC0)ELISA试剂盒 N6-Benzyladenine 1214-39-7 中文名:N6-苄基腺嘌呤 分子式:C12H11N5 度:98.0% 小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 乙酸钠三水(分子生物学级) acetate, trihydrate 质量规格:>99%,分子生物学级 蛋白样品多粘菌素层析法去内试剂盒20 脱叶灵,噻苯隆 Thidiazuron 质量规格:>98%,分子生物学级 蛋白样品赖氨酸层析法去内试剂盒20 (AR) Iodine 质量规格:>99.5%,AR 蛋白样品赖氨酸层析法去内试剂盒20 乙醇脱氢酶 ADA, Alcohol dehydrogenase 质量规格:>300U/mg,BR 蛋白样品树脂法去内试剂盒20 吐温80(化学) Tween-80 质量规格:CP 蛋白样品树脂法去内试剂盒20 吐温80(药用级) Tween-80 质量规格:药用级 蛋白样品液相法去内试剂盒20 吐温80(细胞培养级) Tween-80 质量规格:细胞培养级 蛋白样品液相法去内试剂盒20 葡萄糖酸钾(AR) Potassium-D-gluconate 质量规格:AR 蛋白质A标记二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 PF-562271 PF562271 质量规格:>98%,FAK抑制剂 蛋白质西方杂交10倍清理缓冲液500毫升 海藻酸钠 alginate from brown;Algin 质量规格:BR,度>98% 蛋白质西方杂交10倍印迹膜转移缓冲液500毫升 人脉络膜血管细胞提取物培养Tranexamic acid 1197-18-8 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2 铁测试盒 Iron test case 2-Aminonicotinic acid 5345-47-1 中文名:2-氨基烟酸 分子式:C6H6N2O2 锰测试盒 Manganese test case 6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone 28657-75-2 中文名:6'-氨基-3',4'-(亚甲基二氧代)苯乙酮 分子式:C9H9NO3 镍测试盒 Nickel test case 2-Amino-3-methylbenzoic acid 4389-45-1 中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸 分子式:C8H9NO2 盐快速测试盒 Niate rapid test case 5-Aminouracil 932-52-5 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 调节活化蛋白 英文名称: Human Raes 规格: 48T/96T 英文缩写: RAES |