人子宫成纤维细胞提取物培养

人子宫成纤维细胞提取物【Human Uterine: Normal Uterine Fibroblast Derivatives】

人子宫成纤维细胞提取物是从人子宫成纤维细胞提取的，人子宫成纤维细胞从正常人子宫组织制备。正常人子宫组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

移液管7-Anilino-hydroxy-naphthalenesulfonic acid117-苯胺基-羟基-萘磺酸

移液器架Benzanilide938苯甲酰苯胺

樱花记号笔 紫色Benzoin1193安息香

荧光定量封板膜张/盒 张/盒 0张/盒3-Benzalphthalide57513-亚苄基苯酞

载玻片片/盒L-Aspartic acid564L-天门冬氨酸
Ophiopogonin D  中文名：麦冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%  兔子白介素2elisa试剂盒   兔子白介素2试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子白介素2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子白介素2试剂盒、兔子白介素2elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

β-Sitosterol  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  人α2巨球蛋白elisa试剂盒   人α2巨球蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人α2巨球蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人α2巨球蛋白试剂盒、人α2巨球蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Thevetin B  中文名：  分子式：C42H66O18  度：97.5%  兔内皮型合成酶(eNOS)ELISAKit  

6,7-Dihydroneridienone A  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISAKit  

Dregeoside A11  中文名：  分子式：C55H88O22  度：%  兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISAKit
硬脂酸镁  Magnesium stearate  质量规格：BR 甲基纤维素细胞克隆试剂盒10/50/80

孔雀石绿盐酸盐(>90%,BS)  Malachite green hydrochloride  质量规格：>90%,BS 甲萘醌溶液(1毫摩尔)50毫升

无水硫酸锰(>98%,BR)  Manganese (II )sulfate anhydrous  质量规格：>98%,BR 甲紫(cresylviolet)复染试剂盒50

丙硫异烟胺  Prothionamide  质量规格：>98.5%,BR 简单细菌酚品红染色试剂盒50

丙硫异烟胺(标准品)  Prothionamide  质量规格：>98%,标准品 简单细菌甲基蓝染色试剂盒50

重水,氧化氘(0.55ml*10)  Deuterium Oxide  质量规格：D,99.9% 简单细菌结晶紫染色试剂盒50

重水,氧化氘(0.6ml*10)  Deuterium Oxide  质量规格：D,99.9% 简易化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒50

重水,氧化氘(0.6ml*10)  Deuterium Oxide  质量规格：D,99.96% 简易化学法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50

重水,氧化氘(10G)  Deuterium Oxide  质量规格：D,99.96% 胶原蛋白酶消化试剂盒20毫升

重水,氧化氘(25G)  Deuterium Oxide  质量规格：D,99.9% 胶原酶I(CollagenaseI)ELISA检测试剂盒MonkeyCollagenaseIELISAKit 96T/48T
人子宫成纤维细胞提取物培养Tanshinone IIB  17397-93-2  中文名：丹参酮IIB  分子式：C19H18O4  度：97.0%  关键词：  神经保护; 抗氧化; 丹参; 鼠尾草属; 二萜醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒  

Tanshinone IIA  568-72-9  中文名：丹参酮IIA  分子式：C19H18O3  度：98.5%  关键词：  抗肿瘤; 抗癌; 丹参; 二萜醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒           

Tanshinone I  568-73-0  中文名：  分子式：C18H12O3  度：96.0%  关键词：  抗肿瘤; 抗癌; 鼠尾草属; 二萜醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit  

Sunitinib malate  341031-54-7  中文名：苹果酸舒尼替尼  分子式：C26H33FN4O7  度：98.0%  关键词：    小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISAKit  

Sulfaquinoxaline  59-40-5  中文名：磺胺喹噁啉  分子式：C14H12N4O2S  度：98.0%  关键词：    小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISAKit

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。