小鼠肾小管平滑肌细胞提取物说明书

小鼠肾小管平滑肌细胞提取物【Mouse Tubular：Normal TubularDerivatives】

小鼠肾小管平滑肌细胞提取物是从小鼠原代肾小管平滑肌细胞提取的，小鼠原代肾小管平滑肌细胞从正常小鼠肾小管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

牛奶中金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒（无需过夜培养）24T/48TNebivolol hydrochloride16929盐酸奈必洛尔

牛奶中沙门氏菌核酸检测试剂盒（无需过夜培养）24T/48TN-Demethylricinine216428

霍乱弧菌恒温核酸检测试剂盒24T/48Tn-Butyl-β-D-fructopyranoside678847

单核细胞增生李斯特菌恒温核酸检测试剂盒24T/48Tn-Butyl β-D-fructofuranoside971-正丁基-β-D-呋喃果糖苷

大肠埃希氏菌O157：H7恒温核酸检测试剂盒24T/48TN-Boc-O-Benzyl-D-serine4717N-Boc-O-苄基-D-丝氨酸
Loxoprofen  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3    猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit  

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O    猪可溶性内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit              

Loroglossin  中文名：  分子式：C34H46O18    猪雌激素(E)ELISA试剂盒  

Loratadine  中文名：氯雷他定  分子式：C22H23ClN2O2    猪雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒  

Loperamide hydrochloride  中文名：盐酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2    猪雌二醇(E2)ELISA试剂盒
盐酸阿米替林  HPLC≥98% 100mg MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA试剂盒小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去甲替林盐酸盐 HPLC≥98% 20mg MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA试剂盒小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格：96T/48T

苯佐卡因  HPLC≥99% 100mg MouseSomatostatin,SSELISA试剂盒小鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

飞燕草色素 HPLC≥98% 10mg MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISA试剂盒小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

矮牵牛色素   HPLC≥98% 5mg MouseSubstanceP,SPELISA试剂盒小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芍药素  HPLC≥98% 10mg MousesubstancePreceptor,SP-RELISA试剂盒小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒规格：96T/48T

锦葵色素  HPLC≥98% 10mg MouseSuperOxidaseDimase,SODELISA试剂盒小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环腺苷 HPLC≥98% 20mg Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISA试剂盒小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒规格：96T/48T

安息香 HPLC≥99% 100mg MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISA试剂盒小鼠末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D绵子糖 HPLC≥98% 20mg MouseTestoterone,TELISA试剂盒小鼠睾同(T)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠肾小管平滑肌细胞提取物说明书多酚氧化酶(PPO）测试盒   可见分光光度法   50管/24样  Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO  度：98.0%  关键词： 

多巴胺   英文名称：   Human Dopamine   规格：   48T/96T   英文缩写：   DPN  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  中文名：  分子式：C28H46O2  度：%

动植物组织葡萄糖含量试剂盒   酶标法    50管/48样  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride  中文名：  分子式：C14H18ClN3O4  度：98.0%

动植物组织葡萄糖含量试剂盒   可见分光光度法    50管/48样              4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride  中文名：  分子式：C14H18ClN3O4 

动物组织基因组提取试剂盒   Animal tissue genomic Exaction Kit  Periplocoside F  119902-17-9  中文名：  分子式：C63H104O23  度：98.0%  关键词：

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。