我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。 产品名称 | 英文名称 | 货号 | 小鼠支气管成纤维细胞说明书 | Mouse Airway: Normal Bronchial Fibroblasts | EYX98839 |
小鼠支气管成纤维细胞【Mouse Airway: Normal Bronchial Fibroblasts】 产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时的稳定。在公司部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项: 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 营养琼脂斜面25克 Humanαmannosidase,αManaseELISA试剂盒人β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒规格:96T/48T TrypticSoyAgar 100g原装 BD 236940 ELISAKitTG小鼠甲状腺球蛋白规格:48T/96T 己糖激酶shēng huà shì jì容量:RT10克 HumanAngiogenin,ANGELISAKit人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4-羌基本加醋;队羌基本加醋;队本酚加醋 4-xy7noxybqnzoic ccid 99-96-7 人抗髓1脂抗体IgA(ai-myelin Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 酶测试盒shēng huà shì jì容量:RT20个/包 小鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)免疫试剂盒 Mouse Soluble Toll-like Receptor 2,sTLR2 ELISA Kit 沃来西脱蓝B,英文名或英文缩写:Oracet blue B,级别:BS,规格:5克 HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2873-29-2D-三乙酰葡萄糖烯Tri-O-acetyl-D-glucal 人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 BPB溴酚兰100毫升CP,98% 猪*状腺原氨酸(T3)免疫试剂盒 Pig i-iodothyronine,T3 ELISA Kit 1.2-环己二安 1,2-Dicminocyclohqxcnq 694-83-7 HumanapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 甘油单油醋酯(-20℃) MONOMYRISTIN 72682-84-6 HumanMannmabindinglectieceptor,MBLRELISA试剂盒人甘露糖凝集素受体(MBLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 日落黄1毫升 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 58-60-6基核酸嘌呤酶素PUROMYCIN AMINONUCLEOSIDE Human tissue factor pathway inhibitor (TFPI) ELISA Kit 人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒 2,6-二基庚二酸,英文名或英文缩写:2,6-Diaminopimelic acid,级别:BR,90%,规格:10克 Humanmaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 N-乙酰基-4-酮 N-Acetyl-4-piperidone 32161-06-1 5G 通用试剂 HumanIerleukin8,IL-8ELISA试剂盒人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒规格:96T/48T 三拂磺醋镧 LcNTHcNUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 2093-6- 组织二酯酶(PDE)总活性荧光定量检测试剂盒20次 小鼠支气管成纤维细胞说明书录唑青霉素钠,英文名或英文缩写:Cloxacillin wo7ium salt hydrate,级别:高纯,916ug/mg,规格:5KU 英文名称MouseIgGELISAKit小鼠免疫球蛋白G(IgG)规格:96T/48T 7440-48-4钴标准溶液Cobalt 白细胞冻存试剂盒50次 五肽促胃液素,英文名或英文缩写:Pentagastrin,级别:BR,98%,规格:100克 RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA试剂盒兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 谷转酶 Glutamic-Pyruvic Transaminase(≥75 uni... 9000-86-6 200UN 通用试剂 小鼠γ-基(γABA)ELISA试剂盒 ,英文名: γABA ELISA Kit 酰炳同铁 99.9+% Fqrric ccqtylccqtonctq 1404-18-1 人网膜素(omein)ELISA检测试剂盒HumanomeinELISAKit 96T/48T 注意事项: 1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 |