人胃癌组织提取物培养

人胃癌组织提取物【Cancer: Human Stomach Cancer Derivatives】

胃癌是消化道中常见的恶性肿瘤，按组织结构的不同可以分为粘液癌、腺癌、未分化癌和特殊类型癌四种。公司科技提供来自新鲜或冷冻人体人胃癌组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。这些临床定义的人体组织标本采集自各地方医院，采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

SMCC0mgTolazoline hydrochloride597盐酸妥拉唑林

Sulfo-SMCCmgMeclizine hydrochloride142盐酸美克洛嗪

3-Maleimidopropionic acid N-hydroxysuccinimide ester0mg6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41

Fluorescein-maleimide25mg佐匹克隆

Tetramethylrhodamine-(and)-maleimide *Mixed isomers*25mgCapecitabine 2',3'-diacetate162
Emtricitabine  143491-57-0  中文名：恩曲他滨  分子式：C8H10FN3O3S    人Apelin36elisa试剂盒   人Apelin 36试剂盒   规格型号：96T/48T   人Apelin 36试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人Apelin 36试剂盒、人Apelin 36 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Dasatinib  302962-49-8  中文名：达沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S    鸡白介素4elisa试剂盒   鸡白介素4试剂盒   规格型号：96T/48T   鸡白介素4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鸡白介素4试剂盒、鸡白介素4 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O    小鼠泰泽病原体elisa试剂盒   小鼠泰泽病原体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠泰泽病原体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠泰泽病原体试剂盒、小鼠泰泽病原体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4    人着丝粒蛋白B(CENPB)酶联吸附测定试剂盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  99469-99-5  中文名：  分子式：C13H16O5    人中心体蛋白110(CEP110)酶联吸附测定试剂盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit
人参炔醇 HPLC≥98% 5mg HISTONEH3蛋白共沉淀分析试剂盒5

人参三醇 HPLC≥98% 20mg HIS标记蛋白Ni-A树脂再生试剂盒20

人参皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS标记蛋白化试剂盒5

人参皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS标记蛋白扩增试剂盒10

人参皂苷CK HPLC≥98% 20mg HIS钓饵(PULLDOWN)检测试剂盒5

人参皂苷F HPLC≥98% 20mg HMMA高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20

人参皂苷F HPLC≥98% 20mg HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE细胞膜变检测试剂盒50

人参皂苷F HPLC≥98% 10mg Hollande固着液50毫升

人参皂苷F HPLC≥98% 20mg HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2

人参皂苷Rb HPLC≥98% 20mg HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
人胃癌组织提取物培养兔损伤分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA试剂盒     5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit     5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羟甲基糠醛  分子式：C6H6O3  度：%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。