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小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书

小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书
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小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书的详细资料:

产品名称

小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书

英文名称

Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives

货号

EYX99118

小鼠小肠平滑肌细胞提取物【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives

小鼠小肠平滑肌细胞提取物是从小鼠小肠平滑肌细胞提取的,小鼠小肠平滑肌细胞从正常小鼠小肠组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

 实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

病毒核酸四重实时荧光PCR检测试剂盒Tα-Spinasterol glucoside17456α-菠甾醇葡萄糖苷

甲型H1N1亚型/季节性H3亚型/Victoria/Yamagata系人类流感病毒四重实时荧光PCR检测试剂盒Tα-Spinasterol acetate46516α-菠甾醇乙酸酯

甲型/乙型/甲型H1N1亚型/季节性H3亚型人类流感病毒四重实时荧光PCR检测试剂盒Tα-Lipoic acid778α-硫辛酸

ABT9+7 呼吸道病毒多重PCR快速检测试剂盒Tα-Lapachone473

肺炎链球菌多重PCR血清分型检测试剂盒Tα-D-Glucose4922α-D-葡萄糖
Mesterolone  1424-00-6  中文名:甲氢睾酮  分子式:C20H32O2    人转移因子(TF)酶联吸附测定试剂盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

Testosterone undecanoate  5949-44-0  中文名:十一酸睾酮  分子式:C30H48O3    人转运蛋白1(TNPO1)酶联吸附测定试剂盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit               

4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名:4-氯去氢甲基睾酮  分子式:C20H27ClO2    人转铁蛋白(FELISA试剂盒  

Cholesterol  57-88-5  中文名:胆固醇  分子式:C27H46O    人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒  

Mefenamic acid  61-68-7  中文名:甲灭酸  分子式:C15H15NO2    人转甲状腺素蛋白(T)ELISA试剂盒
盐酸克林霉素(标准品)  Clindamycin HCl  质量规格:>800μg/mg,含量测定 冰冻切片组织CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

盐酸维拉帕米  Verapamil HCl  质量规格:>99%,USP32,BR,可用于细胞培养 冰冻切片组织CASPASE-4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

盐酸维拉帕米(标准品)  Verapamil HCl  质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

霉酚酸; 麦考酚酸;MPA  Mycophenolic acid  质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

霉酚酸; 麦考酚酸(标准品)  Mycophenolic acid  质量规格:HPLC>97%,标准品 冰冻切片组织CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

阿莫西林/羟氨苄青霉素  Amoxicillin   质量规格:BR级,可用于细胞培养,度99%以上,三水合物,USP30 冰冻切片组织CASPASE-8蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

阿莫西林(标准品)  Amoxicillin   质量规格:含量测定 冰冻切片组织CASPASE-9蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

非诺贝特  Fenofibrate  质量规格:>99%,EP6.0 冰冻切片组织CDK2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

非诺贝特(标准品)  Fenofibrate  质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织CDK3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20

丙磺舒  Probenecid  质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
小鼠小肠平滑肌细胞提取物说明书蚕多巴胺   英文名称:   Bombyx Dopamine   规格:   48T/96T   英文缩写:   DPA  Methyl β-D-fructofuranoside  中文名:甲基-β-D-果糖苷  分子式:C7H14O6 

菜豆凝集素elisa试剂盒   菜豆凝集素试剂盒   规格型号:96T/48T   菜豆凝集素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:菜豆凝集素试剂盒、菜豆凝集素elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名:4-氯去氢甲基睾酮  分子式:C20H27ClO2 

补体C4测定试剂盒(比浊法)                    Rifampicin  13292-46-1  中文名:利福平  分子式:C43H58N4O12 

表皮生长因子受体   英文名称:   epidermal growth factor receptor   规格:   48T/96T   英文缩写:   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名:  分子式:C28H44O4  度:97.0%

表皮生长因子受体   英文名称:   epidermal growth factor receptor   规格:   48T/96T   英文缩写:   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名:  分子式:C28H44O4

 运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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