人食管上皮细胞提取物

人食管上皮细胞提取物【Human Esophageal: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives】

人食管上皮细胞提取物是从人原代食管上皮细胞提取的，人原代食管上皮细胞从正常人食管上皮组织制备。正常人食管组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

转基因植物NOS终止子单重荧光PCR检测试剂盒48N-Acetylcaprolactam18881N-乙酰己内酰胺

玉米转基因Bt176单重荧光PCR检测试剂盒484-Aminoantipyrine1983/7/84-氨基安替比林

玉米转基因Bt11单重荧光PCR检测试剂盒 482-Amino-chlorobenzophenone71992-氨基-氯二苯甲酮

大豆特异性基因Lectin单重荧光PCR检测试剂盒482-AcetylH-Isoindole,3(2H)-Dione197192-乙酰基H-异吲哚,3(2H)-二酮

玉米特异性基因Invertase单重荧光PCR检测试剂盒48DL-Alanyl-DL-Mine19993DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸
PlasmidMaxiKit   10T                 Uzarigenin digitaloside  61217-80-9  中文名：  分子式：C30H46O8 

PlanNAplus   40ml  Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8 

PH值快速测试盒   PH quick test case                 Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S 

PH精密试纸   PH precision test paper                 Risperidal  106266-06-2  中文名：利培酮  分子式：C23H27FN4O2 

PH广范试纸   PH wide range test paper  Risperidal  106266-06-2  中文名：利培酮  分子式：C23H27FN4O2  度：98.0%  关键词：
紫杉醇  Paclitaxel  质量规格：>99%,BR,用于细胞培养,药剂造模 Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA试剂盒大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

紫杉醇（标准品）  Paclitaxel  质量规格：HPLC>98%,标准品 Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAKit大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸帕洛诺司琼  Palonosetron HCl  质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养 Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA试剂盒大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硫酸巴龙霉素  Paromomycin Sulfate  质量规格：≥675 U/mg,USP28 RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硫酸巴龙霉素(标准品)  Paromomycin Sulfate  质量规格：含量测定 RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISA试剂盒大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲磺酸帕珠沙星  Pazufloxacin Mesilate  质量规格：≥98%,BR Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAKit大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲磺酸帕珠沙星（标准品）  Pazufloxacin Mesilate  质量规格：HPLC>98%,标准品 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISA试剂盒大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲磺酸培氟沙星  Pefloxacin mesylate dihydrate  质量规格：≥99.0% ,水合物 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

甲磺酸培氟沙星（标准品）  Pefloxacin mesylate dihydrate  质量规格：HPLC>98%,标准品 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISA试剂盒大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

培美曲塞二钠  Pemetrexed Di  质量规格：>99%,BR,水合物 RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISAKit大鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人食管上皮细胞提取物Senkyunolide E  中文名：  分子式：C12H12O3  度：%  兔子球蛋白A(IgA)ELISAKit  

Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氢洋川芎内酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  兔子可溶性细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit  

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4  度：%  兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit  

Digalactosyldiacylglycerol  中文名：双半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15  度：%  兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISAKit               

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  兔子可溶性血栓调节蛋白(sTM)ELISA试剂盒

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。