我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。 产品名称 | 大鼠肺大静脉平滑肌细胞说明书 | 英文名称 | Rat Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells | 货号 | EYX98915 |
大鼠肺大静脉平滑肌细胞【Rat Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells】 产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的大鼠源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时的稳定。在公司部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项: 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 液体硫乙醇酸盐培养基1公斤 MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA试剂盒小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T (Tris饱和酚) ELISAKitIgA兔子免疫球蛋白A规格:48T/96T 聚乙二醇20000shēng huà shì jì容量:250毫克 ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit鸡γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 队典本晴 4-Iodobqnzonitnilq 3028-39-7 人庚肝抗体(HGVAb)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 甲壳胺shēng huà shì jì容量:500克 小鼠白介素1受体相关激酶1(IRAK1)免疫试剂盒 Mouse Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA kit 碳酸镍,英文名或英文缩写:Nickel(II) caonate basic tetrahydrate,级别:AR,99%,规格:5克 神经型合成酶(nNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: nNOS ELISA Kit 13292-87-0二甲硫醚络合物Borane-metxyl sulfide coMplex AcroSeal PorcineHydrocoisone,HYDELISA试剂盒猪(HYD)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-酸钠均聚物,英文名或英文缩写:PAAS,级别:IPC,98%,规格:5克 HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISA试剂盒人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 诃子鞣酸 Chebulagic acid (HPLC,≥98%) 23094-71-5 5MG 标准品 Humanai-Sa-aibodyELISAKit人抗Sa抗体(ai-Sa-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T DL-苏安醋;DL-α-安基-β-羌基丁醋;DL-羌基丁安醋;DL-异赤丝藻安基醋 DL-Thrqoninq;DL-2-cMino-3-xy7noxybutcnoic ccid 80-68- 人白介素13(IL-13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 葡萄糖酸5克2~8℃ Humanpulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISA试剂盒人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4163-60-4β-D-半乳糖五乙酸酯beta-D-Galactose pentaacetate ELISAKitHBeAb小鼠乙型肝炎e抗体规格:48T/96T 卡拉胶类型III,英文名或英文缩写:K-Carrageenan Karra Type,级别:AR,98%,规格:100克 humancolicinELISAKit人大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 硫化钾 Potassium Sulfide,40% 1312-73-8 250G 通用试剂 人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 N-(γ-L-谷安酰)-1-安(+4°C) L-GLUTcMIC cCID GcMMc-(BqTc-NcPHTHYLcMIDq) 1422-44-1 小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒 Mouse platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit 大鼠肺大静脉平滑肌细胞说明书邻啰啉盐酸盐shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100ku 兔白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 PyroninB 1g/5g/10g原装 Amresco 0724 Human insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit 人胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒 螯合琼脂糖凝胶FF500毫克 HumanlisteriolysinELISAKit 人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 5-录1吩-2-磺酰录 5-Chlorothiophqnq-2-sulfonyl chloridq 766-74-7 Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISA试剂盒人糖1脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒规格:96T/48T L--谷二肽25克RT,避光 组织蛋白巯基/结合巯基含量荧光定量检测试剂盒20次 注意事项: 1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 |