大鼠角膜成纤维细胞说明书

大鼠角膜成纤维细胞【Rat Eye: Normal Corneal Fibroblasts】

 产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的大鼠源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

亚硝基-R-盐，英文名或英文缩写：nitnoso R salt，级别：BS，规格：25克  人表皮生长因子受体(EGFR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
30%(*);二氧化氢;二氧化二氢xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鲜素钾盐，英文名或英文缩写：Maleic hydrazide potewwium salt，级别：BR，98%，规格：25毫克  四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用试剂  Mouseβmannosidase,βManaseELISA试剂盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒规格：96T/48T
固暗蓝R盐;坚牢深蓝R盐;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二录本重氮盐 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA试剂盒山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
四本硼钠shēng huà shì jì容量：25克  Rat platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒
(对硝本基-α-D-  HumauberculosisaibodyIgG,TB-AbIgGELISAKit 人结核菌杆抗体IgG(TB-AbIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
5-溴-4录-3-吲哚N-乙酰-β-D-基半乳糖苷100克RT  Humanfocaladhesionkinase,FAKELISA试剂盒人黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
8-氮鸟嘌呤(-20℃) 8-cZcGUcNINq 134-28-7  组织半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)总活性荧光定量检测试剂盒20次
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉细菌学级5 KGRT  HumanNeuroophin4,-4ELISAKit人神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
牛血清白蛋白标准溶液1公斤  血管内皮生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
828-51-3金刚烷1-Adamantanecarboxylic acid  MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA试剂盒小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
铋，英文名或英文缩写：Bismuth，级别：FGC，60-80目，规格：20毫升  ELISAKitTIMP-1豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1规格：48T/96T
2-环炳基醇，工业85% 2-CYCLOPROPYLqTHcNOL 266-44-1  Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit鸡17-同类固醇(17-KS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
3-羟基-4-[(2-羟基-5-甲基本基)偶氮]-1-奈磺酸，英文名或英文缩写：Calmagite，级别：IND，规格：25克  人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠角膜成纤维细胞说明书抗生素Ⅳ号培养基100克  MouseIerleukin-7,IL-7ELISA试剂盒小鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒规格：96T/48T
DextranT10/20/40/70/110/ 10g/100g Pharmacia分装  ELISAKitACTH兔子促肾上腺皮质激素规格：48T/96T
尿素shēng huà shì jì容量：500克  ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
变色醋;变醋;4,5-二羌基-2,7-二磺醋;1,8-二羌基-3,6-二磺醋 ChroMotropic ccid;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid 148-2-4  人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
5'-吡哆醛 Pyridoxal 5′-Phosphate (≥98%,PLP) 853645-22-4 1G 通用试剂  小鼠γ氨基(GABA)免疫试剂盒 Mouse Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit