我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。 产品名称 | 英文名称 | 货号 | 小鼠角膜成纤维细胞说明书 | Mouse Eye: Normal Corneal Fibroblasts | EYX98899 |
小鼠角膜成纤维细胞【Mouse Eye: Normal Corneal Fibroblasts】 产品描述:公司提供的原代细胞均来自新鲜组织,公司提供的小鼠源原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时的稳定。在公司部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项: 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 胰蛋白酶(猪胰),英文名或英文缩写:Trypsin(porcine pancreas),级别:BR,100-250u/mg,规格:500克 猪S100B蛋白(S-100B)免疫试剂盒 Pig Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 7791-7-3一水高录酸钠wo7ium PERCHLORATE MONOHYDRATE 病毒H7亚型(AIV-H7)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T APS-TEMEDTAETSAPS/TEMED 聚合生物技术级白色至微黄色COLDsigma HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA试剂盒人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2--1,3-二甲基咪... 2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium h... 164298-27-5 5G 通用试剂 ELISAKitpERK猪化细胞外信号调节激酶规格:48T/96T 呋他同 Furcltcdonq 139-91-3 HumanechinococcusaibodyIgGELISAKit人包虫抗体IgGELISA试剂盒规格:96T/48T 锑,英文名或英文缩写:Antimony,级别:CP,98.5%,规格:500毫升 人蛋白激酶C(PKC)ELISA检测试剂盒HumanproteinkinaseC,PKCELISAKit 96T/48T NHS-d-biotin 5mg 原装/25mg 原装 Sigma H1759 大鼠谷胱甘肽(GSH)免疫试剂盒 Rat Glathione,GSH ELISA Kit HCTISSUEFIXATIVE100/CS组织固定剂组织学级30MLRT CLIAKitforvisfatinELISAKit大鼠内脂素/内脏脂肪素规格:48T/96T 硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 10043-32-3 毛发元素荧光定量检测试剂盒20次 BOC-L-TryptophanN-叔丁氧羰基-L-色酸10克BR,99% ELISAKitHelicalPeptide人螺旋肽规格:48T/96T 粒shēng huà shì jì容量:RT25克 小鼠ⅡD组1脂酶A2(PLA2G2D)ELISA试剂盒 ,英文名: PLA2G2D ELISA Kit potewwiumChloride 100g/250g/500g/1kg Amresco 0395 人促黄体激素(LH)ELISA检测试剂盒Humanleoopichormone,LHELISAKit 96T/48T 生根粉100克 大鼠泛素蛋白(Ub)免疫试剂盒 Rat Ubiquitin,Ub ELISA Kit 6-溴吲哚 6-Bromo-1H-indolq 2412/9/9 CLIAKitforUb(MouseUbiquitin)ELISAKit小鼠泛素蛋白规格:48T/96T β-蛋白组学级250MLRT 柠檬酸化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒20/50次 小鼠角膜成纤维细胞说明书嶙酸二正丁酯100毫克2~8℃ ELISAKitBRCA-2人癌易感蛋白2规格:48T/96T 1824-81-32-基-6-甲基,99%2-Amino-6-metxylpyridine 小鼠白介素33(IL-33)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-33 ELISA Kit 三扶乙酰shēng huà shì jì容量:RT1克 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA检测试剂盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T 2,6-二溴本醌-4-录亚安 2,6-DIBROMOinoneONq-4-CHLOROIMIDq 237-42-1 人T细胞活化连接蛋白(LAT)免疫试剂盒 Human LAT ELISA Kit 软海绵酸,英文名或英文缩写:OA,级别:BR,58-60℃,规格:25克 英文名称MouseEpinephrineELISAKit小鼠(Epinephrine)规格:96T/48T 注意事项: 1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 |