设为主页  |  加入收藏
新闻动态
·婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3双十二优惠活动
·标准鸡血清(无菌 未经灭活)感恩节活动
·人横纹肌肉瘤细胞十一月优惠活动
·大鼠角膜上皮细胞试剂盒​双十一优惠活动如火如荼地进行中
·MC3T3-E1 Subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆优惠活动
·兔基质金属蛋白酶抑制因子1elisa检测试剂盒试剂优惠活动
·齿垢密螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒优惠活动
产品搜索
产品目录
ELISA试剂盒
细胞
血清
培养基
生化试剂
标准品/对照品
抗体
ATCC细胞
PCR试剂盒
elisa检测试剂盒
质粒
定量PCR试剂盒
细胞培养
联系我们
联系我们
上海一研生物科技有限公司
地址:上海嘉定区澄浏公路52号
电话:021-69985169
邮编:201102
传真:
联系人:高丽琴
手机:13611928337
技术文章
·脱纤维驴血(无菌 pet瓶装)操作步骤
·小鼠晶状体上皮细胞提取物实验通用规则
·拉沙热病毒PCR检测试剂盒用途
·鸭瘟(DVE)Elisa试剂盒操作步骤
·家鸡胚胎来源细胞培养操作注意事项家鸡胚胎来源细胞培养操作注意事项
 
 
产品展示 Products 您现在的位置:首页 > 产品展示
 首页 > 产品展示 > 细胞培养 > 细胞培养、鉴定试剂盒 > PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书

PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书

PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书
点击放大
产品型号:
产品报价:
产品特点:
公司细胞现货供应,PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
  PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书的详细资料:

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品货期短,价格优,售后齐全。

产品名称

英文名称

货号

PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书

 

EYX99661

 

PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。

细胞培养方法;

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项;

1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2.   加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。

小鼠再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA试剂盒 ,英文名: REG3γ ELISA Kit  135247-95-9白头翁皂苷B说明书  Pulchinenoside B

白介素2受体(IL-2R)ELISA检测试剂盒MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  14216-03-6常春藤苷C品牌  Hederacoside C

犬抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(AVP)试剂盒 Dog arginine vasopressin,AVP ELISA kit  366814-42-8苦苏花皂苷C规格  Cussosaponin C

英文名称HumanPAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISAKit规格:96T/48T  128730-82-5常春藤苷H  Kalopanaxsaponin H

化线粒体IIL-3羟酰基-CoA脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒20  173220-07-0构树碱A说明书  Broussonetine A
20554-84-1小白菊内酯规格  Parthenolide   英文名称RatPAPELISAKit大鼠纤溶酶-抗纤溶酶复合物检测(PAP)规格:96T/48T

20547-45-9鸡屎藤苷品牌  paederoside   英文名称RatPAPELISAKit大鼠前列腺酸性1酸酶(PAP)规格:96T/48T

20362-31-6牛蒡子苷规格  Arctiin   英文名称RatPAPELISAKit大鼠前列腺酸性1酸酶(PAP)规格:96T/48T

2034-69-7西瑞香素规格  Daphnoretin  英文名称RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒细胞胞浆抗体(甲固定)(pANCA)规格:96T/48T

20318-30-3澳洲茄边碱品牌  Solamargine   英文名称RatpANCAELISAKit大鼠抗中性粒细胞胞浆抗体(甲固定)(pANCA)规格:96T/48T
小鼠转化生长因子β(TGFβ1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβ1 ELISA Kit  572-31-6黄杞苷说明书  Engeletin

小鼠糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA检测试剂盒MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T  21967-41-9黄芩苷品牌  Baicalin

人抗SS-B/La抗体试剂盒 Human SS-B/La Aibody,ELISA Kit  491-67-8黄芩素规格  Baicalein

Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKitα2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒规格:96T/48T  860-79-7黄杨碱  Cyclovirobuxin D

载玻片细胞IL蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  140360-29-8灰毡毛忍冬皂苷甲说明书  Macranthoidin A
PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书65604-80-0麦冬皂苷D’规格  Ophiopogonin D   组蛋白H3-K27乙酰化检测试剂盒10/20

6559-91-74-去甲基表鬼臼  4#146;-Demethylepipodophyllotoxin   组蛋白H3-K27(mono/di/i)甲基化检测试剂盒10/20

65497-07-6商陆皂苷甲说明书  EsculentosideA   组蛋白H3-K23乙酰化检测试剂盒10/20

65497-07-6商陆皂苷甲  esculentosideA  组蛋白H3-K23甲基化(mono/di)检测试剂盒10/20

654055-01-3桑色素  Morin hydrate  组蛋白H3-K18乙酰化检测试剂盒10/20

注意事项;

1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 

 

产品相关关键字: 大鼠肾成纤维 细胞试剂盒
 如果你对PrimaCell™大鼠肾成纤维细胞试剂盒说明书感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
 
本站推荐产品:主营产品:PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。
上海一研生物科技有限公司(www.y-reagent.com) 版权所有 总访问量:405020 地址:上海嘉定区澄浏公路52号 邮编:201102
电话:021-69985169 传真: 手机:13611928337 联系人:高丽琴 邮箱:3004994300@qq.com
技术支持:智慧城市网 管理登陆 ICP备案号:沪ICP备14030958号-5
在线客服
021-69985169
13611928337
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
 

智慧城市网

推荐收藏该企业网站