大鼠大隐静脉组织提取物说明书

大鼠大隐静脉组织提取物【Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Derivatives】

大隐静脉是长的静脉，静脉血管壁薄、内腔大，内膜折叠形成静脉瓣。静脉瓣一般成对排列，呈半月状小袋，袋口朝向心，利于静脉回流，防止血液逆流。公司科技提供来自新鲜或冷冻大鼠大隐静脉组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

CTP 5’-三磷酸胞苷二钠   mg2-(2-Aminoethyl)-methylpyrrolidine51382-(2-氨乙基)-N-甲基

Cytosine 胞嘧啶   5g2-(2-Aminobenzoyl)-benzoic acid114732-(2-甲酰)-苯甲酸

D-(+)Galactose D-半乳糖   25g 2-(2,2-Dimethyl,3-dioxolan-yl)propane,2-diol1291418

D-(+)-Galacturonic acid D-半乳糖醛酸   1g 1-Testosterone1965/6/51-睾酮

DAB 3,3’-二氨基胺四盐酸水合物   1g/ 5g1-O-Methylnataloe-emodin33921
Coumarin 6  中文名：香豆素 6  分子式：C20H18N2O2S  度：98.0%  小鼠白介素-17(mouse IL-17)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Benzotetramisole  中文名：苯并四咪唑  分子式：C15H12N2S  度：98.0%  小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒  

Anthraflavic acid  中文名：二羟蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%  小鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒  

1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  中文名：1,4-苯并二氧六环-6-羧酸  分子式：C9H8O4  度：98.0%  小鼠八聚体结合转录因子4（OCT4）ELISA试剂盒  

Benactyzine hydrochloride  中文名：盐酸贝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%  小鼠基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）ELISA试剂盒
内消旋-2,3-二巯基丁二酸(>98.0%(T))  meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid  质量规格：>98.0%(T) 人玻连蛋白(VTN)试剂盒 Human vionectin ELISA Kit

吡哆醛-L-谷氨酸二钾盐[药物研究配体]  Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt  质量规格：药物研究配体 人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA检测试剂盒Humanvionectin,VELISAKit 96T/48T

吡哆醛-L-异亮氨酸钾盐[药物研究配体]  Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt  质量规格：药物研究配体 人补体1q(C1q)ELISA检测试剂盒HumanCompleme1q,C1qELISAKit 96T/48T

1,4,7,10-四氮杂环十二烷四盐酸盐(>98.0%(N))  1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride  质量规格：>98.0%(N) 人补体1q(C1q)试剂盒 Human Compleme 1q ELISA Kit

己二酸双(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Adipate  质量规格：>98.0%(GC) 人补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)试剂盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgG,C1INH-IgG ELISA Kit

3,4-苯并芘(升华精制品)(>95.0%(GC))  3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)  质量规格：>95.0%(GC) 人补体1抑制物抗体-IgM(C1INH-IgM)试剂盒 Human Compleme 1 inhibitor aoaibody-IgM,C1INH-IgM ELISA Kit

双(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))  Bis(phenylacetyl) Disulfide  质量规格：>98.0%(HPLC) 人补体3裂解产物(C3SP)试剂盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit

苯并红紫4B[pH指示剂]  Benzopurpurine 4B  质量规格：pH指示剂 人补体7(C7)试剂盒 Human Compleme 7 ELISA Kit

五甲氧基红(>98.0%(HPLC))  Pentamethoxy Red  质量规格：>98.0%(HPLC) 人补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(C1QTNF1/CP1)试剂盒 Human C1QTNF1 ELISA Kit

苯甲基橙(>95.0%(W))  Benzyl Orange  质量规格：>95.0%(W) 人补体蛋白3(C3)试剂盒 Human Compleme 3,C3 ELISA Kit
大鼠大隐静脉组织提取物说明书组织多肽抗原(TPA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  2,2'-Bicinchoninic acid  1245-13-2  中文名：2,2'-二辛可宁酸  分子式：C20H12N2O4  度：98.0%   

组胺(HIS)ELISAKit     Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯达唑  分子式：C12H15N3O2S 

组胺(HIS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  中文名：2-萘酚苄基醚  分子式：C17H14O  度：98.0%

转化生长因子β1elisa试剂盒   转化生长因子β1试剂盒   规格型号：96T/48T   转化生长因子β1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：转化生长因子β1试剂盒、转化生长因子β1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Agomelatine  138112-76-2  中文名：阿戈美拉汀  分子式：C15H17NO2  度：98.0%  关键词： 

转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒     Afatinib  850140-72-6  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3  度：98.0%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。