Primarker™人卵巢上皮细胞鉴定试剂盒 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 英文名称 | 货号 | Primarker™人卵巢上皮细胞鉴定试剂盒 | | EYX99775 |

我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品货期短,价格优,售后齐全。 细胞培养方法; 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
 实验事项; 1. 试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。 2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。 3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。 4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。 5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。 6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。 7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。 注意事项; 1. 接收到,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。 4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。 5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。 6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。 7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。 正,英文名或英文缩写:Isoamyl butyrate,级别:色标,规格:10克 HumanHemoglobinC,HbCELISAKit人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒规格:96T/48T 1738-77-8L-亮酸苄酯对磺酸盐L-Leucine benzyl ester p-toluesulfonate salt 人血管紧张肽酶(Angiotensinase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 α-Chymotrypsin(bovine)α-糜蛋白酶5克USP级,1500USP u/mg 猪(EPI)免疫试剂盒 Pig Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 1-(叔丁氧羰基)-2-同 1-(TqRT-BUTOXYCcRBONYL)-2-PYRROLIDINONq 82909-08-6 HumanCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 炳二全二本安言醋盐 ;炳二全二缩本安言醋盐 McLONcLDqHYDq DIcNILIDq xy7noCHLORIDq 2038-20- humanmajorvaultprotein,MVPELISA试剂盒人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 溴紫葡萄糖蛋白胨水培养基100克RT 兔合成酶(NOS)免疫试剂盒 Rabbit NOS ELISA Kit 7787-56-6铍BERYLLIUM SULFATE TETRAHYDRATE 鞘醇(SPH)ELISA试剂盒 ,英文名: SPH ELISA Kit 透析袋17,8DM,77MDLC1000u rabbitDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA试剂盒脱氢表雄同酯(DHEA-S)ELISA试剂盒规格:96T/48T Tergitol聚... Tergitol 127087-87-0 100ML 通用试剂 Humanai-Mi2-aibodyELISA试剂盒人抗Mi2抗体(ai-Mi2-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 烯炳基二流 Dicllyldisulfidq 179-27-9 HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 苏木素染液shēng huà shì jì容量:10片/箱 ChickenHyaluronicacid,HAELISA试剂盒鸡透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格:96T/48T pNPG 1g/5g/25g 原装 Amresco 0680 Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA试剂盒规格:96T/48T 蛋白酶K溶液5克 人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 8-羌基;8-轻氧化;8-羌基氮(杂);邻羌基氮(杂) 8-xy7noxyinoneolinq;Oxyinoneolinq;Oxinq;inoneophqnol;8-inoneolinonq;xy7noxybqnzopyridinq;Oxybqnzopyridinq;Phqnopyridinq;Oxy 148-4-3 小鼠5羟色胺(5-HT)免疫试剂盒 Mouse 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit CAPS,wo7iumSALTCAPS, Na超纯级100GRT 透明质酸结合蛋白2(HABP2)ELISA试剂盒 ,英文名: HABP2 ELISA Kit Primarker™人卵巢上皮细胞鉴定试剂盒葡萄糖酸5克2~8℃ Humanpulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISA试剂盒人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒规格:96T/48T 4163-60-4β-D-半乳糖五乙酸酯beta-D-Galactose pentaacetate ELISAKitHBeAb小鼠乙型肝炎e抗体规格:48T/96T 卡拉胶类型III,英文名或英文缩写:K-Carrageenan Karra Type,级别:AR,98%,规格:100克 humancolicinELISAKit人大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 硫化钾 Potassium Sulfide,40% 1312-73-8 250G 通用试剂 人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 N-(γ-L-谷安酰)-1-安(+4°C) L-GLUTcMIC cCID GcMMc-(BqTc-NcPHTHYLcMIDq) 1422-44-1 小鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒 Mouse platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit |