小鼠淋巴成纤维细胞提取物【Mouse lymphoid: Normal lymphoid Derivatives】 小鼠淋巴成纤维细胞提取物是从小鼠原代淋巴成纤维细胞提取的,小鼠原代淋巴成纤维细胞从正常小鼠淋巴组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 小鼠淋巴成纤维细胞提取物 | 英文名称 | Mouse lymphoid: Normal lymphoid Derivatives | 货号 | EYX99163 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 流感病毒N2型单重荧光PCR检测试剂盒48N-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143 乙型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒481,5-Pentanediol diacrylate3685 丙型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Atracurium oxalate642288阿曲库胺草酸盐 甲型/乙型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒48Lurasidone3675147鲁拉西酮 甲型H1N1/甲型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒481,2,3-Triacetyl-deoxy-D-ribose622113 Ketoconazole 65277-42-1 中文名:酮康唑 分子式:C26H28Cl2N4O4 度:98.0% 关键词: 小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 Jacaranone 60263-07-2 中文名: 分子式:C9H10O4 度:98.0% 关键词: 细胞毒活性; 果胶幼虫诱导剂; 千里光属; 雪叶莲属; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒 Ivermectin B1a 71827-03-7 中文名:依维菌素 分子式:C48H74O14 度:98.0% 小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA试剂盒 Ivabradine hydrochloride 148849-67-6 中文名:盐酸伊伐布雷定 分子式:C27H37ClN2O5 度:98.0% 关键词: 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒 Isosorbide dinitrate 87-33-2 中文名:硝酸异山梨酯 分子式:C6H8N2O8 度:98.0% 关键词: 小鼠糖皮质激素 英文名称: glucocoicoid 规格: 48T/96T 英文缩写: GC 新橙皮苷二氢查尔酮 HPLC≥98% 20mg HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新对叶百部碱 HPLC≥98% 20mg HumanSialicacid,SAELISAKit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 新苦味素 HPLC≥98% 20mg Humansolubleansferrieceptor,sTfRELISAKit人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新鲁斯可皂苷元 HPLC≥98% 20mg Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新绿原酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新芒果苷 HPLC≥98% 20mg HumanSomatostatin,SSELISAKit人生长抑素(SS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新藤黄酸 HPLC≥98% 20mg HumanSomelysin-1,ST1ELISAKit人基质裂解素(ST1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新西兰牡荆苷 HPLC≥98% 10mg HumanSomelysin-3,ST3ELISAKit人基质裂解素(ST3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 新知母皂苷BII HPLC≥98% 20mg Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人山梨醇脱轻酶(SDH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小鼠淋巴成纤维细胞提取物碱性蛋白酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样 Tetracaine hydrochloride 中文名:盐酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2 碱性成纤维生长因子 英文名称: basic fibroblast growth factor 规格: 48T/96T 英文缩写: b-FGF 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone 90-93-7 中文名:四乙基米氏酮 分子式:C21H28N2O 碱性0酸酶(AKP)检测 Acid phosphatase (ACP) detection Polypodine B 中文名:水龙骨甾酮B 分子式:C27H44O8 甲状腺球蛋白抗体 英文名称: Human Thyroglobulin Aibody 规格: 48T/96T 英文缩写: TGAb Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名:甲磺酸培氟沙星 分子式:C18H24FN3O6S 甲型流感H5N1 英文名称: Influenza A H5N1(Avian Flu) HA 规格: 48T/96T 英文缩写: H5N1 HA Prosapogenin A 19057-67-1 中文名:薯蓣次皂苷A 分子式:C39H62O12 度:% 关键词: 细胞毒活性; 麦冬; 螺甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 |