小鼠甲状腺组织提取物培养

小鼠甲状腺组织提取物【Thyroid: Normal Mouse Thyroid Derivatives】

小鼠甲状腺位于颈部甲状软骨下方，气管两旁。甲状腺的主要功能是合成甲状腺激素，调节机体代谢。公司科技提供来自新鲜或冷冻小鼠甲状腺组织中高质量的总RNA，PCR准备的第一条cDNA链，蛋白质及其亚组分。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

GoodViewTM 核酸染料1mlConduritol A5267牛弥菜醇A

低电渗琼脂糖 Agarose-LE0g5-Epilithospermoside847991

新型蛋白酶K Mutant Proteinase K0mgNeochlorogenic acid63新绿原酸

5-溴-氯-吲哚半乳糖苷 X-Gal1gFicaprenol 112629

尿素 Urea0gEthyl β-D-ribo-hex-ulopyranoside49538
Dehydroadynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H62O17  度：96.0%  兔血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISAKit  

11,12-Di-O-acetyltenacigenin B  中文名：  分子式：C25H36O7  度：98.5%  兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit  

Tenacissoside I  中文名：通关藤苷I  分子式：C44H62O14  度：%  α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISAKit              

Stigmasta-4,25-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O  度：%  兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒  

Stigmasta-4,22,25-trien-3-one  中文名：  分子式：C29H44O  度：%  兔可溶性P选择素（sP-selectin）ELISA试剂盒
七叶皂苷 Purity≥98% 20mg ELISAKitVIP人血管活性肠肽规格：48T/96T

七叶皂苷A HPLC≥98% 10mg ELISAKitVK1人维生素K1规格：48T/96T

七叶皂苷B HPLC≥98% 10mg ELISAKitVPI人血管活性肽酶抑制剂规格：48T/96T

七叶皂苷C HPLC≥95% 10mg ELISAKitVWF人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子规格：48T/96T

七叶皂苷D HPLC≥95% 10mg ELISAKity-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ规格：48T/96T

七叶皂苷Iia HPLC≥98% 10mg ELISAKitypsin人胰蛋白酶规格：48T/96T

七叶皂苷IIb HPLC≥98% 10mg ELISAKit亲环蛋白人肽酰脯氨酰异构酶规格：48T/96T

七叶皂苷钠 Purity≥98% 20mg ELISAKi人神经降压素规格：48T/96T

桤木酮 HPLC≥98% 20mg ELISA分析20样本

漆黄素 HPLC≥98% 20mg ELISA*制备试剂盒10
小鼠甲状腺组织提取物培养皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒     9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  3236-71-3  中文名：9,9-双(4-羟苯基)芴  分子式：C25H18O2 

皮质醇(Coisol)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  11,12-Di-O-acetyltenacigenin B  中文名：  分子式：C25H36O7  度：98.5%

皮质elisa试剂盒   皮质试剂盒   规格型号：96T/48T   皮质试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：皮质试剂盒、皮质elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  9-Anthracenylmethyl acrylate  31645-34-8  中文名：丙烯酸-9-蒽甲酯  分子式：C18H14O2 

皮质elisa试剂盒   皮质试剂盒   规格型号：96T/48T   皮质试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：皮质试剂盒、皮质elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2 

皮质/上腺(CO)ELISA试剂盒     9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  3236-71-3  中文名：9,9-双(4-羟苯基)芴  分子式：C25H18O2  度：98.0%

运输和保存；
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。