PrimaCell™人血管内皮细胞试剂盒 总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 产品名称 | PrimaCell™人血管内皮细胞试剂盒价格 | 英文名称 | | 货号 | EYX99505 |
实验要点及说明； 1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存； 视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
 操作要点； 1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISA试剂盒大鼠成纤维细胞生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T 64439-81-210-羟基喜树碱品牌 10-Hydroxycamptothecin 小鼠组织蛋白酶S(CTSS)ELISA试剂盒 ，英文名： CTSS ELISA Kit 13-去羟基印乌碱规格 13-Dehydroxyindaconintine 绵羊白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T 473-08-5a-香附酮 α-Cyperone 犬胰岛素样因子3(INSL3)试剂盒 Dog insulin-like 3,INSL3 ELISA Kit 50-99-7D-无水葡萄糖说明书 D(+)-Glucose 英文名称MouseApelin-12ELISAKIT小鼠Apelin-12规格：96T/48T 10284-63-6D-松醇品牌 D-Pinitol
96553-02-5丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯说明书 gypsogenin-3-O-β-D-gluco pyranoside 组织基质金属蛋白酶(MMP-9)活性荧光定量检测试剂盒20 96315-53-6虎掌草皂甙D品牌 Huzhangoside D 组织基质金属蛋白酶(MMP-9)活性比色法定量检测试剂盒20 961-29-5异甘草素品牌 Isoliquiritigenin 组织基质金属蛋白酶(MMP-8)活性比色法定量检测试剂盒20 961-29-5异甘草素规格 Isoliquiritigenin 组织基质金属蛋白酶(MMP-7)活性比色法定量检测试剂盒20 960383-96-4盐酸药根碱 Jatrorrhizine 组织基质金属蛋白酶(MMP-3)活性荧光定量检测试剂盒20
Ratadrenomedullin,ADMELISAKit大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 82508-31-4土槿皮乙酸品牌 Pseudolaric Acid B 载玻片细胞TUBULIN蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 546-43-0土木香内酯规格 Alantolactone Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T 5289-74-7蜕皮激素 Ecdysterone 小鼠脂多糖(LPS)ELISA试剂盒 ，英文名： LPS ELISA Kit 73-31-4褪黑素说明书 Melatonin 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)ELISA检测试剂盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 96T/48T 30045-16-0脱氢紫堇碱品牌 Dehydrocorydaline
PrimaCell™人血管内皮细胞试剂盒价格126054-77-1苍术苷A规格 atractyloside A 英文名称RatF1+2ELISAKit大鼠凝血酶原片段F1+2规格：96T/48T 1258-84-0扁塑藤素说明书 Pristimerin 英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格：96T/48T 1258-84-0扁塑藤素品牌 Pristimerin 英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格：96T/48T 1257-08-5表儿茶素没食子酸酯品牌 ECG 英文名称RatET-1Elisakit大鼠内皮素1(ET-1)Elisakit规格：96T/48T 125675-09-4苦蒿素规格 Blinin 英文名称RatET-1Elisakit大鼠内皮素1(ET-1)Elisakit规格：96T/48T |
